CARY BLAIR MEDIUM: BEGRUNDELSE, KLARGØRING OG ANVENDELSE - BIOLOGI - 2025

Den gennemsnitlige Cary Blair er en halvfast agar, der bruges til transport og konservering af biologiske prøver, der indeholder tarmpatogener, mikroorganismer og anaerob labil. Som alle transportmidler er dens funktion at holde prøven under optimale forhold, indtil den dyrkes. De tilstedeværende patogene mikroorganismer såvel som den ledsagende mikrobiota skal forblive levedygtige, men uden at øge deres befolkning.

Cary Blair Medium er resultatet af formuleringsændringen af ​​Stuart Transport Medium. Modifikationen blev udført i 1964 og bestod af at erstatte pH-reguleringssystemet (glycerophosphat) med en fosfateret uorganisk puffer.

A. Culturette med Cary Blair Medium B. skammel Collector med Cary Blair Medium. Kilde: A. Video Meganhow, få en sårkultur 2011 youtube.com B. Bruger: Mattes

Omformuleringen var nødvendig, fordi dens skabere indså, at glycerophosphat efter en bestemt tid kunne metaboliseres af nogle saprofytiske bakterier. Disse multiplicerer overlapper de tilstedeværende patogener.

Andre ændringer var eliminering af methylenblåt såvel som en justering af pH-værdien mod alkalinitet (pH 8,4). Alle disse ændringer forbedrede effektiviteten af ​​transportmidlet.

Oprindeligt blev Cary Blair-medium brugt til vedligeholdelse af tarmpatogener, såsom Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae og Campylobacter sp.

Imidlertid er effektiviteten til at bevare levedygtigheden af ​​krævende og labil patogener, såsom: Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae og nogle anaerober, blevet efterfølgende set.

Basis

Cary Blair Medium indeholder natriumchlorid, natriumthioglycollat, dinatriumphosphat, calciumchlorid og agar.

Natriumchlorid opretholder den osmotiske balance i mediet, dinatriumphosphat og calciumchlorid afbalancerer pH. For sin del opretholder natriumthioglycolat et lavt oxidationsreduktionspotentiale, mens den lille del af agar giver den halvfaste konsistens.

Cary Blair-mediet indeholder ikke næringsstoffer, da funktionen af ​​et transportmedium er at holde prøven uden at den gennemgår ændringer med hensyn til fugtighed og mikrobiel belastning; det betyder, at den undgår dehydrering af prøven, mens levedygtigheden og mængden af ​​de tilstedeværende mikroorganismer bevares.

Endelig forhindrer den let alkaliske pH-værdi døden af ​​mikroorganismer som følge af surhedsgrad, især Vibrios er meget følsomme over for syrer.

Forberedelse

Cary Blair-medium er kommercielt tilgængeligt som en speciel brugsklar enhed. Transportsystemet er dækket af en plastisk Peel Pack-taske. Inde i den indeholder en pinde til opsamling af prøven og beholderrøret til Cary Blairs halvfaste medium.

Også på markedet er der kommercielle huse, der leverer det dehydrerede medium til dets forberedelse i laboratoriet.

For at gøre dette vejes 13,2 g af det dehydrerede medium og opløses i en liter destilleret vand. Varm op og ryst præparatet, indtil det er helt opløst. Fordel mediet i skruetrækkede reagensglas (Bakelite).

Damp rørene i 15 minutter. Lad køle af og hold ved stuetemperatur, indtil brug.

Uinokuleret Cary Blair-medium kan opbevares optimalt i op til 18 måneder ved stuetemperatur.

Mediets pH-værdi skal indstilles til 8,4 ± 0,2. Farven på det forberedte medium er beige med en vis opalescens.

Brug

Type prøver

Cary Blair Medium bruges, når afføringsprøver, rektalpinde og vaginalpinde ikke kan behandles med det samme.

Når der ikke er noget transportmiddel til rådighed, kan prøver opbevares ved -70 ° C.

Prøveudtagning

Pinden er imprægneret med prøven, og den indføres i Cary Blair-mediet uden at nå bunden.

Identifikation af prøven

Cary Blair-mediet skal have en etiket, hvori de grundlæggende data er placeret, såsom: for- og efternavn på patienten, identifikationsnummer for prøven, kilde til prøveudtagning, behandlende læge, dato og tidspunkt for indsamling. prøve, formodet diagnose, antibiotisk behandling.

Overførsel

Tæt dækket og transporteret ved stuetemperatur i tilfælde af fækale prøver. Der henviser til, at der til vaginale prøver på jagt efter anaerobe mikroorganismer anbefales at transportere prøverne ved 4 ° C.

I alle tilfælde er den anbefalede overførselstid 4-6 timer, med maksimalt 24 timer.

Hvis der er mistanke om tilstedeværelse af Campylobacter jejuni i afføringsprøver, og disse ikke kan behandles inden for 24 timer, anbefales opbevaring i Cary Blair-medium ved 4 ° C.

Undersøgelser udført på Cary Blair transportmidler

Flere undersøgelser har vist, at Cary Blair-medium kan forblive levedygtigt for enteropatogene mikroorganismer af slægten Shigella og Salmonella i op til 49 dage efter udtagning af prøven.

Vibrio cholerae, et andet vigtigt tarmpatogen, er i stand til at overleve i 22 dage, mens Yersinia pestis (forårsagende middel for bofonisk og pneumonisk pest) kan udvindes efter 75 dage.

På trods af den påviste holdbarhed med hensyn til nyttiggørelse af disse mikroorganismer anbefales det, at de prøver, der er taget, transporteres i Cary Blair-medium til laboratoriet så hurtigt som muligt.

Ligeledes når prøven når laboratoriet, skal den podes uden forsinkelse i de respektive kulturmedier.

På den anden side anbefales Cary Blair-mediet ud over at være nyttigt til transport af fakultative mikroorganismer også til prøver, der indeholder anaerobe patogener.

I denne forstand gennemførte DeMarco et al. I 2017 en undersøgelse med titlen: Overlevelse af vaginale mikroorganismer i tre kommercielt tilgængelige transportsystemer.

De demonstrerede, at Cary Blair transportmedium er det bedste transportmedium til konservering og nyttiggørelse af vaginale anaerobe mikroorganismer. På samme måde viste de, at den højeste genvindingsgrad blev opnået, når overførselstemperaturen var 4 ° C.

Derfor konkluderes det, at transporttemperaturen for vaginal pinde (anaerobe mikroorganismer) skal være 4 ° C. Mens fecale prøver på jagt efter fakultative mikroorganismer, er den ideelle temperatur stuetemperaturen.

QA

For at evaluere kvalitetskontrollen af ​​Cary Blair transportmedium stammer kendt som Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae og Campylobacter sp.

Mediet inokuleres med den valgte stamme og holdes ved stuetemperatur i 24 timer. De såes derefter i de tilsvarende kulturmedier. I alle tilfælde forventes en tilfredsstillende nyttiggørelse af den pågældende mikroorganisme.

Referencer

1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, et al. Overlevelse af vaginale mikroorganismer i tre kommercielt tilgængelige transportsystemer. Anaerob. 2017 45: 44–49.
2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Sammenligning af konserveringsmedier til opbevaring af afføringsprøver. J Clin Microbiol. 19 nittifem; 33 (8): 2176–2178.
3. Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Sammenligning af konserveringsmedier og fryseforhold til opbevaring af prøver med fæces. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. udg. Redaktionel Panamericana SA Argentina.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 udg. Redaktionel Panamericana SA Argentina.
6. Conda Pronadisa Laboratories. Half Cary Blair. Fås på: condalab.com
7. Metrix Laboratory. Cary Blair. Fås på: metrixlab.mx