- egenskaber
- Forskelle mellem kulturmedier og berigelsesmedier
- Berigede agartyper og anvendelser
- - Blodagar
- Næringsstofagarbase
- Hjerneinfusion agarbase
- Trypticasein Soy Agar Base
- Müeller Hinton Agar Base
- Thayer Martin Agar Base
- Columbia agar base
- Brucella agar base
- Campylobacter agar base
- - Chokoladeagar
- Columbia agar base
- GC base agar base
- Müeller Hinton Agar Base
- Base med Thayer Martin agar
- Referencer
Det berigede kulturmedium består af kombinationen af en næringsagar som en base plus et beriget stof eller en forbindelse. Berikede medier er excellence i blodagar og chokoladeagar.
Begge medier kan fremstilles med en simpel base af en hvilken som helst næringsagar, såsom næringsagar, trypticasein sojaagar eller hjerneinfusionsagar, blandt andre. Ligeledes suppleres begge medier med et stærkt beriget element, der er blod, med den forskel, at det i det første tilfælde bruges defibrineret, og i det andet tilfælde bruges det opvarmet.
To blodagarplader (beriget kulturmedium), der viser beta-hemolyse. Kilde: Pixabay.com
Disse medier indeholder ikke hæmmere, så en lang række mikroorganismer kan vokse på dem, herunder nogle ernæringsmæssigt krævende stammer. I de tilfælde, der allerede er ekstremt krævende, kræves, foruden blod, andre specielle ernæringsmæssige tilsætningsstoffer, som skal føjes til det medium, hvor det er beregnet til at isolere.
På den anden side sættes antibiotika eller andre inhiberende stoffer til et beriget medium, bliver det straks et selektivt beriget medium. Sidstnævnte er nødvendige, når man prøver at isolere meget krævende mikroorganismer fra et område rig på mikrobiota, såsom Haemophilus sp og Neisseria meningitidis isoleret fra en prøve af nasopharyngeal ekssudat.
egenskaber
Disse medier har en ernæringsbase, der består af blandt andet peptoner, gærekstrakter, pancreas-fordøjelse og undertiden glukose. Det indeholder også stoffer, der balanserer pH, vand og agar-agar.
På den anden side kan defibrineret eller opvarmet blod tilsættes, og til gengæld kan specifikke vækstfaktorer inkluderes, såsom: vitaminkomplekser, biotin, para-amino-benzoesyre, hemin, NAD, blandt andre.
Forskelle mellem kulturmedier og berigelsesmedier
Det er vigtigt, at berigede kulturmedier ikke må forveksles med berigelsesmedier. Selvom begge indeholder næringsstoffer og særlige ernæringskrav, er berigelsesmediet flydende og bruges som en forbehandling af prøver, hvor der er mistanke om tilstedeværelsen af en type patogene bakterier, der findes i mindre grad inden for en polymikrobiel blanding.
Berigelsesmediet inhiberer mikroorganismer, der ikke hører til denne gruppe og vil fremme væksten af patogenet.
Derudover har de egenskaben til at reparere skader, der er til stede på den cellulære struktur af mikroorganismen, der skal genvindes, da det normalt kan påvirkes af tidligere modtagne behandlinger, og i denne forstand fungerer mediet og øger dets levedygtighed.
Berigede agartyper og anvendelser
Den mest anvendte berigede agar er blodagar, men dette kan tilberedes med forskellige ernæringsbaser og afhængigt af det ændres nytten af det.
På den anden side er der også chokoladeagar, som er et beriget medium par excellence. Som blodagar kan den imidlertid fremstilles med forskellige ernæringsbaser, ud over at inkludere andre additiver til isolering af hurtige mikroorganismer.
Nedenfor er et resumé af de mest anvendte agarbaser til fremstilling af blodagar og chokoladeagar, samt deres anvendelighed i hvert tilfælde.
- Blodagar
Kultur på blodagar af den fakultative anaerobe bakterie Morganella morganii. Taget og redigeret fra: Bakterier i fotos.
Forberedt med:
Næringsstofagarbase
Det bruges til ikke-krævende bakterier, såsom: Enterobacteriaceae, Pseudomonas sp, S. aureus, Bacillus sp, blandt andre. Det er ikke egnet til hårde bakterier som Streptococcus.
Hjerneinfusion agarbase
Blodagar med denne base er fremragende til de fleste bakterier, inklusive Streptococcus sp, men det anbefales ikke til iagttagelse af hæmolysemønstre. Denne kombination med visse additiver er nyttig til visse mikroorganismer. Eksempler:
Hvis cystin og glukose tilsættes til dette medium, bruges det til at isolere Francisella tularensis. Mens der tilsættes cystint Tellurit, er det nyttigt at isolere Corynebacterium diphteriae.
Ligeledes bruges dette medium til at isolere bakterier af slægten Haemophilus, men i dette tilfælde er det nødvendigt at tilføje bacitracin, majsstivelse, hesteblod og andre berigelsestilskud såsom (IsoVitaleX).
Endelig, hvis det er inkluderet i dets fremstilling (chloramphenicol - gentamicin) eller (penicillin - streptomycin) med hesteblod, er det ideelt til isolering af Histoplasma capsulatum.
Trypticasein Soy Agar Base
Det er fremragende til at fremme væksten af en lang række mikroorganismer, herunder Streptococcus sp, som den mest anbefalede til iagttagelse af hæmolysemønstre.
Hvis det suppleres med cystint Tellurit og lammeblod, er det ideelt til Corynebacterium diphteriae.
Müeller Hinton Agar Base
Ideel til antiogrammer af komplicerede mikroorganismer, såsom Streptococcus sp, såvel som til isolering af Legionella pneumophila.
Thayer Martin Agar Base
Det er ideelt til isolering af arterne Neisseria meningitidis.
Columbia agar base
Det er specielt til isolering af Helicobacter pylori og Gardnerella vaginalis. For større succes tilsættes forskellige typer antibiotika for at hæmme den ledsagende mikrobiota.
Brucella agar base
Kombinationen af lammeblod, vitamin K og Brucella-agar er fremragende til dyrkning af anaerobe bakterier.
Campylobacter agar base
Som navnet antyder, bruges denne base til at isolere Campylobacter jejuni i afføringsprøver. Til dette suppleres det med 5% af fårens blod og cephalothin, amfotericin B, trimethoprim, polymyxin B og vancomycin.
- Chokoladeagar
Chokoladeagar
Forberedt med:
Columbia agar base
Fremstillingen af chokoladeagar med denne base er vidt brugt til at isolere bakterier af Neisseria-slægten.
Det anbefales også til isolering af Brucella sp, men til dette skal K-vitamin tilsættes og hesteblod bruges.
GC base agar base
Det er en af de anbefalede baser til fremstilling af chokoladeagar, især til isolering af gonococci.
Müeller Hinton Agar Base
Nogle hårde mikroorganismer, såsom Streptococcus pneumoniae, kræver dette medium for at være i stand til at udføre den antimikrobielle følsomhedstest.
Det er også nyttigt i isoleringen af Neisserias og Haemophilus, med undtagelse af, at slægten Haemophilus foretrækker hesteblod, da den er rig på faktor X (hemin) og V (NAD).
Undertiden anbefales det at inkludere antibiotika i dets præparat til at hæmme den ledsagende mikrobiota.
Base med Thayer Martin agar
Det anbefales at bruge lammeblod til at tilberede chokoladeagaren med denne base. Dette medium er specielt til isolering af Neisseria gonorrhoeae. Antibiotika tilsættes for at hæmme den ledsagende mikrobiota.
Chokoladeagar (beriget kulturmedium): Kilde: Pixinio.com
Referencer
- Prescott M, Harley P, Klein A. Microbiology, 4th. Redaktion McGraw-Hill Interamericana, 2003, Madrid, Spanien, s. 105-108.
- Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 udg. Argentina. Redaktionel Panamericana SA
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. (5. udgave). Argentina, Redaktion Panamericana SA
- Jawetz E, Melnick J, Adelberg E. (1992). Medicinsk mikrobiologi. (14 ta Edition) Mexico, Editorial El Manuel Moderno.
- González M, González N. 2011. Manual of Medical Microbiology. 2. udgave, Venezuela: Direktoratet for medier og publikationer fra University of Carabobo.