STUART MEDIUM: FUNDAMENT, KLARGØRING OG ANVENDELSER - BIOLOGI - 2025

Den medium Stuart er en halvfast agar eller bouillon uden næringsstoffer, der anvendes til transport af biologiske prøver. Dets formål er at holde de stammer, der er til stede i prøven, levedygtige i en bestemt periode, men uden at øge den mikrobielle population.

Det blev oprettet af Moffet, Young og Stuart i 1948 og senere modificeret af Toshach og Patsula. Det er sammensat af natriumglycerophosphat, natriumthioglycolat, calciumchlorid og agar-agar. Sidstnævnte er til stede i det halvfaste medium og mangler i væsken. Nogle laboratorier tilføjer methylenblå til det.

Culturette med Stuart transport. Kilde: Af: CDC / Dr. Gilda Jones, høflighed: Public Health Image Library

De bruges generelt, når det ikke er muligt at så prøven med det samme. I dette tilfælde anbringes prøven i transportmediet, mens den overføres til laboratoriet, der vil behandle kulturen.

På denne måde er det garanteret, at de tilstedeværende mikroorganismer forbliver i live, indtil de inokuleres i de tilsvarende kulturmedier.

Oprindeligt var dens anvendelse beregnet til at transportere urethrale eller vaginale prøver, hvor der var mistanke om tilstedeværelse af Neisseria gonorrhoeae. Senere indså de, at nytten af ​​den kunne være bredere.

Stuart-mediet viste sig at være meget effektivt til konservering af labile og snævre mikroorganismer, såsom Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, blandt andre. Ud over andre ikke-irriterende mikroorganismer såsom Enterobacteria.

Stuart-mediet forhindrer dybest set tørringen af ​​prøven, opretholder den osmotiske balance og bevarer mikroorganismerne ved en ideel pH. På den anden side indeholder dette medium strategisk ikke næringsstoffer, hvilket forhindrer mikroorganismer i at formere sig.

På markedet findes der specielle prøvetransportanordninger, der indeholder dette eller andre transportmidler, kaldet culturette. De kan også tilberedes på laboratoriet.

Basis

Formålet med Stuart-transportformen er at holde prøverne så tæt på deres oprindelige tilstand, indtil de er behandlet.

Natriumglycerophosphat og calciumchlorid er et puffersystem, der fungerer ved at opretholde pH og osmolaritet.

I mellemtiden fungerer natriumthioglycollat ​​som et reduktionsmiddel, og i tilfælde af at der indeholder agar, giver det det en halvfast konsistens, for at forsinke oxidation af mediet. Endelig er methylenblåt en oxidationsindikator, det vil sige, det registrerer tilstedeværelsen af ​​ilt.

Det halvfaste medium med redox-indikator er ideel til transport af prøver, hvor der er mistanke om tilstedeværelse af anaerobe bakterier.

Karakteristika for transportmidlet

Stuart-mediet opfylder ligesom alle transportmidler visse egenskaber, herunder:

-Bibeholder levedygtige mikrobielle stammer til stede uden at multiplicere.

-Indeholder ikke næringsstoffer; Dens forbindelser er rettet mod at holde prøven hydreret under tilstrækkelige pH- og osmolaritetsbetingelser.

-Hæmmer autolyzatet af nogle delikate mikroorganismer, såsom Pneumococcus.

-Brug er midlertidig, det bør ikke forlænges for længe.

Forberedelse

Halvfast Stuart-medium med redox-indikator

Hjem forberedelse

ingredienser

Natriumglycerophosphat 10 gr

Natriumthioglycollat ​​1,0 gr

Calciumchlorid 0,1 gr

Methylenblå 0,002 gr

Agar-agar 3 gr

Destilleret vand 1 liter

Bland komponenterne og opvarm, indtil de er helt opløst. Hæld i rør eller specielle vatpinde. De indføres i autoklaven og steriliseres ved 121 ° C i 15 minutter. Lad rørene afkøle lodret (i form af en blok). Opbevares ved stuetemperatur.

Fremstilling med kommercielt medium

Vej 14,1 g af mediet i 1 liter destilleret vand. Varm omrystning, indtil den er helt opløst, det kan koges. Resten af ​​proceduren som allerede beskrevet.

Det dehydrerede medium er cremefarvet og tilberedt skal være blåt på overfladen. Dette skyldes tilstedeværelsen af ​​methylenblåt.

Mediets pH skal justeres til 7,4 ± 0,2

Flydende modificeret Stuart Medium (hjemmelavet)

ingredienser

Natriumglycerophosphat 10 gr

Natriumthioglycollat ​​1 gr

Calciumchloriddihydrat 0,1 gr

Destilleret vand 1000 ml

Det har de samme ingredienser som det halvfaste, men det har ikke agar eller methylenblåt. I dette tilfælde blandes komponenterne uden opvarmning, og 0,5 ml fordeles i 16 x 125 mm rør med skruehætter.

Det steriliseres i en autoklav ved 121 ° C i 10 minutter. Til prøveudtagning skal dacron-swabs anvendes, hvis prøven er til PCR eller rayon, hvis det er til kultur.

Rørene opbevares ved stuetemperatur.

Applikationer

Kommercielt er der specielle prøvetransportanordninger kaldet culturette; Denne enhed er et langstrakt, tyndt rør, der har en pind inde og i slutningen er der et segment, der indeholder det halvfaste eller flydende Stuart-medium.

Enheden åbnes, og prøven udtages med vatpinden. Det føres derefter tilbage i røret, indtil spidsen af ​​pinden er indsat i det halvfaste transportmedium; Nogle medbringer en polyurethansvamp imprægneret med det flydende Stuart-medium, som prøven bevares, når den holdes våd.

I tilfælde af, at der er mistanke om tilstedeværelse af delikate mikroorganismer, bør bomuldspinde med trækul bruges til at samle prøven.

De prøver, der kan udtages med vatpinde eller vattetæpper og overføres i dette medium, er svulmesexsudater, rektale vattestykker og forskellige sekretioner, herunder: vaginal, urethral, ​​sår, okulær, øre og abscess.

Under overførsel af prøven i transportmediet til laboratoriet skal undtagelse af mediet underkastes ekstreme miljøforhold (for koldt eller for varmt). Pludselige ændringer i atmosfæretrykket bør også undgås.

Den tid, hvor mediet er i stand til at holde en mikroorganisme levedygtig, afhænger af den pågældende stamme. For eksempel kan mikroorganismer af slægten Neisserias og Haemophilus forblive levedygtige i op til 24 timer, men stammer som Salmonella eller Shigella kan vare i dage og endda uger.

Hvis det estimeres, at behandlingen af ​​prøven kan tage mere end 4 dage, foretrækkes det at fryse prøven ved -70 ° C.

Identifikation af prøven i transportmidler

Det forberedte transportmiddel eller den kommercielle kulturette skal have en etiket, hvor følgende information vil blive placeret:

Patientens for- og efternavn: undgår prøveforvirring.

Identifikationsnummer: det er praktisk at holde en ordre på arbejdet.

Prøveindsamlingskilde: hjælper bakteriologen med at vælge det passende kulturmedium.

Læge hos lægen: Nogle gange er det nødvendigt for mulige konsultationer.

Dato og tid for prøveudtagning: det er nødvendigt for accept eller afvisning af prøven i henhold til den tid, der er gået mellem indsamlingen af ​​prøven og modtagelsen i laboratoriet.

Andre oplysninger, der ville være meget nyttige at vedhæfte, er:

Den formodende diagnose: styrer tilføjelsen af ​​specielle kulturmedier i henhold til den mistænkte diagnose.

Antibiotikabehandling: det er nyttigt at blive knyttet til antibiogrammet.

Alle disse oplysninger er vigtige for at sikre korrekt prøvebehandling.

QA

For at evaluere Stuart-mediets ydelse kan kendte stammer inokuleres og holdes ved 25 ° C, såsom: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus 6301.

I alle tilfælde forventes det, at den pågældende mikroorganisme bliver genvundet, konserveret i 24 timer.

På den anden side kan andre stammer bruges, såsom: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 og EschCerichia coli.

I alle tilfælde forventes rigelig bedring i op til 96 timer.

Begrænsninger

Nogle undersøgelser forsikrer, at glycerophosphatet, der er til stede i Stuart-mediet, kan metaboliseres af nogle coliforme former, blandt andre Gram-negative bakterier, og derfor formere sig i dette medium.

Denne risiko øges, jo længere prøvebehandlingen er forsinket. Ligeledes påvirker eksponeringen af ​​Stuart-mediet for høje temperaturer under transport dette.

Referencer

1. "Transportmiddel (mikrobiologi)." Wikipedia, The Free Encyclopedia. 13 apr. 2018, 10:36 UTC. 1. april 2019. Tilgængelig på: es.wikipedia.org
2. Microkit Laboratories: Culture Media. Stuart Transport. Fås på: Tilgængelig på: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Stuarts transportmidler. Fås på: lablinsan.cl
4. Videnskabelig MDM. Fordelene ved at have mikrobiologisk transportmedium fra Stuart. Fås på: mdmcientifica.com
5. Metrix Laboratories. Stuart. 2017. Tilgængelig på: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 udg. Redaktionel Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. udg. Redaktionel Panamericana SA Argentina.