SELEKTIVE KULTURMEDIER: FOUNDATION, FAST OG FLYDENDE - BIOLOGI

De selektive dyrkningsmedier er buljonger og agarer, der tjener til isolering af en defineret gruppe af mikroorganismer, mens de inhiberer andres udvikling. De er ideelle til såning af polymikrobielle prøver, så patogenet kan udvindes fra den ledsagende mikrobiota.

Der er en lang række selektive medier mellem faste stoffer og væsker. Nogle er beregnet til isolering af Gram-positive bakterier, såsom koagulasepositive Staphylococcus, Lactobacillus, Bifidobacteria osv.

Selektive kulturmedier. Kilde: Air1404

Andre til genopretning af Gram-negative patogener, såsom arter af slægterne Salmonella, Shigella, Vibrio, Bordetella, Brucella, Pseudomonas, blandt andre.

Såvel som der er også dem, der favoriserer væksten af svampe og gær, såsom Candida-arter, Histoplasma, Cryptococcus, dermatophytes, blandt andre.

Det skal bemærkes, at nogle ikke-selektive berigede medier kan blive selektive ved tilsætning af antibiotika. Ligeledes kan nogle kulturmedier være selektive og forskellige på samme tid.

På den anden side er der selektive flydende kulturmedier; nogle kan tjene som berigelsesmedier og favoriserer forværringen af en selektiv gruppe af bakterier, mens de undertrykker andres.

Selektive kulturmedier er vidt brugt i mikrobiologilaboratorier til analyse af forskellige typer prøver; såvel som til isolering af en lang række mikroorganismer af klinisk, industriel, miljømæssig og fødevareinteresse.

Basis

Selektive kulturmedier er baseret på at indeholde næringsstoffer, der favoriserer væksten af en specifik bakterie eller svamp eller af en bestemt gruppe af disse, og samtidig skal de indeholde hæmmende stoffer, der ikke tillader udvikling af andre uønskede mikroorganismer.

Blandt de næringsstoffer, de kan indeholde, er: pancreas fordøjelse af kasein, gærekstrakt, polypeptoner, blandt andre.

Inhibitorer inkluderer: antibiotika, galdesalte, lysegrøn, krystalviolet, basisk fuchsin, eosin, methylenblåt, natriumdeoxycholat, natriumsulfit, sorbitan monoleat, ammoniumcitrat, cetrimid, lithiumchlorid, kalium Tellurit, malachitgrøn, blandt andre.

Undertiden kan medierne være både selektive og differentielle. Ligeledes varierer selektivitetsgraden fra et medium til et andet.

Nogle er meget selektive, kendetegnet ved at have ekstreme fjendtlighedsbetingelser for de fleste mikroorganismer, og hvor kun et lille antal arter er i stand til at modstå de tilstande, der findes i miljøet, og derfor vokser tilfredsstillende. F.eks. TCBS-agar og MRS-agar.

Mens andre er moderat selektive, det vil sige dem, der hæmmer en bestemt gruppe af mikroorganismer, såsom Gram-positive bakterier. På den anden side favoriserer de væksten af en lang række Gram-negative bakterier; for eksempel Mac Conkey-agar.

Endelig er der kulturmedier med en lav selektiv effekt, det vil sige de er dem, der tillader vækst af en lang række bakterier mellem Gram-positiv og Gram-negativ såvel som nogle gær, mens de kun hæmmer en lille gruppe mikroorganismer. Eksempel: EMB-agar.

Selektiv solid kulturmedie

Baird-Parker agar

Medium designet til påvisning af koagulasepositive stafylokokker (Staphylococcus aureus). Indeholder som hæmmende stoffer lithiumchlorid og kalium Tellurit.

BCYE Agar eller gærkulekstrakt bufret Agar

Det er et stærkt beriget kulturmedium, især til isolering af Legionella- og Nocardia-arter. Dette medium bliver selektivt med tilsætning af antimikrobielle stoffer, såsom polymyxin B, vancomycin og anisomycin.

BHI-agar med antibiotika

BHI-agar er oprindeligt et beriget medium, men hvis der tilsættes chloramphenicol og cycloheximid, er det ideelt til selektiv isolering af svampe af klinisk interesse.

BIGGY agar

Selektivt og differentielt medium til isolering af Candida-arter. Det indeholder ammoniumcitrat, vismut og natriumsulfit, der fungerer som hæmmere for bakterievækst.

Bordet Gengou Agar

Beriget og selektivt kulturmedium, især til isolering af B ordetella pertussis og Bordetella parapertussis. Det indeholder cephalexin for at hæmme den ledsagende flora.

Campy agar med blod

Medium brugt til isolering af slægten Campylobacter. Indeholder cefoperazon, vancomycin og amphotericin B til at hæmme væksten af Gram-negative, Gram-positive bakterier og svampe.

Campylobacter Butzler Agar

Specielt medium til isolering af arter af slægten Campylobacter. Det suppleres med hesteblod, blandt andet næringsstoffer. Det indeholder også forskellige inhiberende stoffer, såsom novobiocin, colistin, cefazolin, bacitracin og cycloheximid.

Campylobacter Skirrow Agar

Selektivt medium til isolering af Campylobacter-arter. Indeholder hesteblod og andre næringsstoffer. Som hæmmende stoffer indeholder det vancomycin, polymyxin B og trimethoprim.

CCF-agar eller fruktose-agar, cycloserin, cefoxitin

Som navnet antyder indeholder det cycloserin og cefoxitin som hæmmende stoffer og bruges til isolering af Clostridium diffcile i afføringsprøver, blandt andre tarmprøver.

Cetrimid-agar

Selektivt medium, designet til isolering af Pseudomonas aeruginosa, der favoriserer produktionen af pigmenter. Cetrimid (cetyltrimethylammoniumbromid) er det stof, der hæmmer væksten af andre bakterier end P. aeruginosa.

Chokoladeagar med isovitalex og vancomycin

Dette medium er oprindeligt meget beriget. Tilsætningen af vancomycin er nyttig til selektiv isolering af Neisseria gonorrhoeae og N. meningitidis-stammer.

CIN-agar eller cefsulodin-agar, irgasan, novobiocin

Det er et moderat selektivt kulturmedium til isolering af Yersinia-arter.

CNA-agar (colistin, nalidixinsyre)

Det er et specielt selektivt medium til isolering af Gram-positive bakterier, såsom Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus og gær, men det hæmmer udviklingen af Gram-negative bakterier, såsom Pseudomonas og arter af Enterobacteriaceae-familien.

Czapek agar

Medium designet til dyrkning af saprofytiske bakterier og svampe. Dette medium indeholder uorganisk nitrogen. Af denne grund betragtes dette medium som selektivt, da kun mikroorganismer, der er i stand til at bruge uorganiske forbindelser som den eneste nitrogenkilde, kan udvikle sig.

EMB-agar

Lidt selektivt og differentielt medium, der bruges til isolering af Enterobacteriaceae. Escherichia coli detekteres især på dette medium af den blanke grøn-sorte farve på dens kolonier. Graden af selektivitet, den besidder, skyldes tilstedeværelsen af anilinfarvestoffer (eosin og methylenblå).

Endo agar

Minimalt selektivt og differentielt medium, der bruges til isolering og differentiering af laktosegæring og ikke-fermentering Gram-negative baciller, der tilhører Enterobacteriaceae-familien og til andre familier.

Natriumsulfit og basisk fuchsin hæmmer de fleste Gram-positive bakterier. Escherichia coli på dette medium producerer karakteristiske mørkerøde kolonier med en iriserende grønlig metallisk glans.

Hektoen agar

Selektivt og differentielt medium til isolering af enteropatogene bakterier i Shigella- og Salmonella-slægterne. Som et hæmmende stof indeholder det galdesalte, hvilket undertrykker udviklingen af Gram-positive og nogle Gram-negative bakterier.

Löwenstein-Jensen agar

Medium specielt designet til isolering og udvikling af bakterier i slægten Mycobacterium, især tuberkulosearten, blandt andre.

Mediet indeholder malachitgrønt; Dette stof hæmmer den ledsagende Gram-positive og Gram-negative flora, der har været i stand til at modstå den tidligere desinfektion af prøven. Det indeholder også glycerin, der stimulerer væksten af M. tuberculosis, men hæmmer væksten af M. bovis og andre mikroorganismer.

Mac Conkey-agar

Det er et selektivt og differentielt medium. Det bruges til isolering af ikke-fastidious, fermenterende og ikke-fermenterende Gram-negative stænger.

Dens selektive karakter tilvejebringes ved tilstedeværelsen af galdesalte og krystalviolet. Disse stoffer hæmmer væksten af Gram-positive bakterier og nogle hurtige Gram-negative stænger.

Salt mannitol agar

Selektiv og differentiel agar til isolering af Staphylococcus aureus. Dette medium har en høj koncentration af natriumchlorid, der hæmmer væksten af de fleste bakterier.

SS-agar

Moderat selektivt og differentielt medium til isolering af slægterne Salmonella og Shigella. Mediet indeholder hæmmende stoffer, såsom galdesalte, natriumcitrat og lysegrønt. Disse stoffer undertrykker væksten af Gram-positive bakterier, visse Gram-negative bakterier og nogle coliforms.

Regan Lowe Agar

Selektiv agar til isolering af Bordetella pertussis. Mediet indeholder trækul, cephalexin og amphotericin B som hæmmende stoffer.

SABHI-agar

Selektivt medium til isolering af patogene svampe, såsom dermatophytter, Blastomyces dermatitidis og Histoplasma capsulatum. Indeholder chloramphenicol.

Hestblodagar med bacitracin

Specielt medium til isolering af Haemophilus influenzae. Bacitracin hæmmer den ledsagende flora.

Hestblod trækul agar

Selektivt medium, der er nyttigt til at udvinde Bordetella pertussis og B. parapertussis-stammer fra kliniske prøver. Det indeholder cephalexin for at hæmme den ledsagende flora.

Kanamycin-Vancouveromycin (KV) Blood Agar

Selektivt medium, specielt til isolering af anaerobe bakterier, såsom Bacteroides, Prevotella, Fusobacterium og Veillonella.

Bismuth sulfite Agar

Selektivt medium til isolering af Salmonella enterica undergruppe enterica serotype Typhi. Dette medium indeholder lysegrøn vismutsulfit for at hæmme væksten af Gram-positive mikroorganismer og visse Gram-negative bakterier.

TCBS-agar (thiosulfat, citrat, galdesalte)

Meget selektivt medium til isolering af arter af slægten Vibrio. Det indeholder natriumcitrat, ox galde og en alkalisk pH, der hæmmer den ledsagende flora.

Thayer-Martin agar

Meget nærende og selektivt medium til isolering af Neisseria meningitidis og Neisseria gonorrhoeae. Den ledsagende flora hæmmes af tilstedeværelsen af vancomycin, colistin og nystatin.

Lysegrøn agar

Selektivt medium til isolering af stammer af slægten Salmonella. Som navnet antyder, indeholder det lysegrønt som et hæmmende stof. Dette forhindrer vækst af Gram-positive bakterier og et stort antal Gram-negative mikroorganismer.

Vogel-Johnson agar

Det er et selektivt og differentielt kulturmedium, formuleret til isolering af Staphylococcus aureus og hæmmer væksten af Gram-negative bakterier og endda nogle Gram-positive. De hæmmende stoffer er kalium Tellurit, lithiumchlorid og glycin.

XLD-agar

Det er et selektivt og differentielt medium til isolering af Salmonella og Shigella enteropathogener. Natriumdeoxycholat giver mediet den selektive karakter.

CHROMagar (Candida Medium)

Det er et selektivt og differentielt medium til hjælp i isolering og identifikation af Candida-arter. Mediet indeholder chloramphenicol til at hæmme væksten af bakterier.

Middle Ellinghausen McCulough Johnson og Harris (EMJH)

Selektivt medium til dyrkning af Leptospiras. Det indeholder polysorbat 80, som hæmmer væksten af de fleste bakterier.

Selektive flydende kulturmedier

BHI Bouillon NaCL 6,5%

Selektiv bouillon til opsving af Enterococcus. Den høje koncentration af natriumchlorid hæmmer væksten af den ledsagende mikrobiota.

EF-bouillon

Selektiv bouillon til genopretning af totale og fækale coliformer. Indeholder galdesalte, der hæmmer væksten af andre mikroorganismer.

GN-bouillon

Selektiv bouillon til nyttiggørelse af Salmonella og Shigella. Indeholder natriumcitrat og natriumdeoxycholat, som hæmmer Gram-positive bakterier og coliforms.

Rappaport-Vassiliadis Broth

Det er et selektiv berigelsesmedium for Salmonella-arter. Indeholder malachitgrønt som et hæmmende stof.

Selenit bouillon

Det er et selektivt kulturmedium, der er nyttigt til berigelse af prøver, hvor der er mistanke om tilstedeværelse af enteropatogene bakterier af slægten Salmonella.

Som navnet antyder, indeholder det natriumselenit som et hæmmende stof, hvilket undertrykker væksten af Gram-positive bakterier og de fleste bakterier i mave-tarmkanalen.

Tetrathionat bouillon

Selektiv bouillon til berigelse og nyttiggørelse af stammer af slægten Salmonella.

Tetrathionatet dannet ved reaktionen dannet mellem natriumthiosulfat og den joderede opløsning, der er til stede i mediet, hæmmer væksten af coliforms og favoriserer udviklingen af bakterier, der indeholder enzymet tetrathionat-reduktase (Salmonella).

Det indeholder også galdesalte, og nogle sorter inkluderer lysegrøn; begge stoffer hæmmer de fleste Gram-positive og nogle Gram-negative bakterier (coliformer).

Campy Thioglycollate bouillon

Speciel bouillon til fremme af udviklingen af C. jejuni subsp jejuni. Indeholder amphotericin B, cephalothin, polymyxin B, trimethropim og vancomycin.

Todd-Hewitt bouillon med blod og antibiotika

Det tjener til at berige prøverne og fremme udviklingen af Streptococcus agalactiae fra vaginale sekretioner. Som hæmmende stoffer indeholder den nalidixinsyre og gentamicin eller colistin.

Referencer

Klinisk mikrobiologisk kulturmedie (studieår 2012-2013). Fås på: asignatura.us.es
BD Laboratories. Campylobacter Skirrow Agar og Campylobacter Butzler Agar. 2013. Tilgængelig på: bd.com
IVD Laboratories. Löwenstein-Jensen. 2011. Tilgængelig på: bio-rad.com
Neogen Laboratories. GN-bouillon (Hajna). Fås på: foodsafety.neogen.com
BD Laboratories. CHROMagar. Candida Medium 2014. Tilgængelig på: bd.com
BD Laboratories. Rappaport Vassiliadis Broth. 2003. Tilgængelig på: bd.com
Lifeder.com Webportal. Fås på: Lifeder.com
BD Laboratories. Leptospira Medium Base EMJH2011 Tilgængelig på:
Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. udg. Redaktionel Panamericana SA Argentina.
Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 udg. Redaktionel Panamericana SA Argentina.

SELEKTIVE KULTURMEDIER: FOUNDATION, FAST OG FLYDENDE - BIOLOGI - 2025