Den smear er et diagnostisk værktøj til aktiv lungetuberkulose. Det er en laboratorieteknik, der tillader påvisning og måling af syrehurtige baciller, såsom Mycobacterium tuberculosis. Det er den mest anvendte metode på verdensplan til at stille diagnosen aktiv lungetuberkulose i samfundet og til at evaluere fordelene ved behandling.
Lungetuberkulose er en infektiøs sygdom forårsaget af Mycobacterium tuberculosis, der inficerer lungerne, men kan påvirke andre organer og systemer. På verdensplan lider mere end 6 millioner mennesker af lungetuberkulose (TB).
M. tuberculosis celler i en sputum udstrygning (Kilde: Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) via Wikimedia Commons)
Mycobacterium tuberculosis og andre ikke-tuberkuløse Mycobacterium-arter har en lipidbelægning på cellevæggen, der er rig på mycolsyre, som er modstandsdygtig mod misfarvning af sur alkohol efter farvning med basiske farvestoffer.
Derfor anvendes specielle farvningsmetoder, såsom Ziehl-Neelsen-metoden. Disse enkle og billige metoder tillader væggen at bevare pletten, når prøven skylles med en syreopløsning, og Mycobacterium-væggen bliver rød i modsætning til andre bakterier, der bliver blå.
For at udføre en smørmikroskopi kræves en sputumprøve, fortrinsvis taget om morgenen, når du står op. Vævsprøver eller kropsvæskeprøver kan også bruges.
Behandle
Prøverne, der skal behandles til smøremikroskopi, er sputumprøver, vævsprøver eller prøver af kropsvæsker. Vævsprøver kan ekstraheres ved bronkoskopi eller ved biopsier af lymfeknuder eller andet væv.
Da tuberkulose kan påvirke ethvert organ eller system, kan prøverne være meget forskellige, herunder: urinprøver, cerebrospinalvæske, pleuravæske, ascitisk væske, blod, pus fra åbne hulrum, biopsier, etc.
Ekstrapulmonale læsionsprøver bør også behandles til kultur. Sputumprøver opsamles i morgentimerne, når de stiger.
Flere prøver kan indsamles i række eller på sammenhængende dage. Prøver skal mærkes i lukkede, videmundede flasker. De skal have patientens data, typen af prøven og datoen for prøveindsamlingen.
Teknisk procedure
- Når først prøven er opnået, kan den centrifugeres til koncentrering eller anvendes direkte. Den indledende procedure består i at anbringe et par dråber af prøven og sprede dem på et objektglas.
- Prøven er dækket med filtreret fuchsin (farvningsopløsning).
- Derefter opvarmes det, indtil der er opnået ca. tre emissioner af hvidlig damp.
- Vent fem minutter på, at prøven afkøles, og vask den med vand.
- Det er dækket med blegemiddelopløsning (sur alkohol) i en periode på 2 minutter.
- Det vaskes igen med vand.
- Prøven er dækket med methylenblå og fik lov til at henstå i et minut.
- Vaskes af med vand.
- Lad det tørre i luften og fortsæt til observationen under mikroskopet.
Fotografi fra et mikroskop (Billede af Konstantin Kolosov på www.pixabay.com)
Denne procedure er hurtig, enkel, billig og gør det muligt for Mycobacterium tuberculosis celler at farve rødt. Denne teknik kaldes Ziehl-Neelsen farvningsteknik.
Mikroskopisk observation består i at identificere tilstedeværelsen af syrehurtige baciller og deres kvantificering efter felt.
Mycobacterium tuberculosis celler vises som røde, kornede, buede stænger på en blå baggrund. De kan isoleres, parres eller grupperes. Observation skal udføres af felt, og mindst 100 felter skal undersøges for hver udtværing.
Resultatet betragtes som positivt, når der i hvert felt er mere end 10 M. tuberkuloseceller. Dette svarer til 5.000 til 100.000 baciller for hver milliliter prøve.
I disse tilfælde betragtes det som positivt for Mycobacterium tuberculosis, da den ikke-tuberkuløse Mycobacterium eller andre syreresistente bakterier har forskellige former, og generelt er den observerede mængde pr. Felt mindre end 10.
Personen, der undersøger prøven, skal have erfaring eller ekspertise i påvisning og genkendelse af disse mikroorganismer, da der kan forekomme falske negativer eller falske positiver i resultaterne.
Der er andre fluoroskopiske teknikker, der er mere følsomme, men meget dyrere. En sådan teknik anvender Auramin-O-farvning til opnåelse af en grøn fluorescens eller Auramin O / Rhodamine B-farvning for at observere en gul / orange fluorescens.
Positive tilfælde udføres generelt til kultur og antiogram for at bekræfte diagnosen og det passende valg af behandling.
Hvad er smøremikroskopi til?
Tuberkulose er en infektiøs sygdom, der påvirker lungens og andre organer og organsystemer i kroppen. Det er en smitsom sygdom, der producerer alvorlige kvæstelser i luftvejene, som, hvis de ikke behandles korrekt, kan forårsage patientens død.
Tuberkulose overføres næsten udelukkende gennem dråber, der er ophængt i luften fra slimhinden hos en patient inficeret med lungetuberkulose. Disse små dråber kan forblive i luften og har evnen til at inficere den person, der inhalerer dem.
M. tuberculosis celler (Kilde: NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) via Wikimedia Commons)
Infektion kræver forlænget kontakttid med en inficeret patient, der konstant spytter baciller i dårligt ventilerede omgivelser. Mennesker med immundeficiens er mere tilbøjelige til at blive inficeret.
HIV-positive patienter er mere tilbøjelige end resten af befolkningen til at udvikle alvorlige luftvejsinfektioner, inklusive lungetuberkulose. Derfor er vigtigheden af udtværingsmikroskopi som en hurtig og billig diagnostisk metode til tuberkulose.
Udstrygningsmikroskopi gør det muligt at foretage en bakteriologisk diagnose af tuberkulose, men et positivt resultat skal bekræftes med andre undersøgelser.
Undersøgelser, der bekræfter diagnosen tuberkulose, inkluderer røntgenundersøgelser, der viser karakteristiske billeder i de øverste lobes i lungen, positive tuberkulintest og positive prøvekulturer.
Udtværing negativ
En negativ smudsmikroskopi udelukker ikke nødvendigvis diagnosen tuberkulose, da især når prøven er sputum, er eliminering af baciller ikke konstant. Derfor er serielle prøver i disse tilfælde, når der er mistanke om diagnosen, nødvendige.
Positiv udstrygning
En positiv smudsmikroskopi er tegn på tuberkulose og skal bekræftes med andre komplementære undersøgelser. Hver gang resultatet er positivt, bør der dyrkes en kultur og et antibiogram.
Når behandlingen er etableret, tillader et vedvarende fald i positivitetsskalaen af udtværingsmikroskopien, indtil der opnås negative resultater, kontrol af fordelene ved behandlingen.
Referencer
- Aziz, MA (2002). Ekstern kvalitetsvurdering for AFB-smøremikroskopi.
- Desikan, P. (2013). Sputumudstrygningsmikroskopi ved tuberkulose: er det stadig relevant ?. Den indiske tidsskrift for medicinsk forskning, 137 (3), 442.
- Fauci, AS, Kasper, DL, Hauser, SL, Jameson, JL, & Loscalzo, J. (2012). Harrisons principper for intern medicin (Vol. 2012). DL Longo (red.). New York: Mcgraw-hill.
- Ngabonziza, JCS, Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M.,… & Muvunyi, CM (2016). Diagnostisk ydeevne for udstrygningsmikroskopi og inkrementalt udbytte af Xpert til påvisning af lungetuberkulose i Rwanda. BMC infektionssygdomme, 16 (1), 660.
- Sardiñas, M., García, G., Rosarys, MM, Díaz, R., & Mederos, LM (2016). Betydningen af kvalitetskontrol af bacilloskopi i laboratorier, der udfører diagnose af tuberkulose. Chilenske tidsskrift for infektologi: Officielt organ for det chilenske samfund af infektologi, 33 (3), 282-286.
- Sequeira de Latini, MD, & Barrera, L. (2008). Manual til bakteriologisk diagnose af tuberkulose: standarder og teknisk vejledning: del 1-smøremikroskopi. I Manual til bakteriologisk diagnose af tuberkulose: standarder og teknisk vejledning: del 1 smøremikroskopi (s. 64-64).