ANTISTREPTOLYSIN O: KVANTIFICERING, RATIONALE, TEKNIK, PATOLOGIER - BIOLOGI - 2025

The O ASO er antistof frembragt som svar på en infektion forårsaget af Streptococcus pyogenes, også kendt som Streptococcus beta-hæmolytiske A. Denne gruppe producerer to exotoksiner med hæmolytiske aktivitet opkald streptolysins "S" og "O".

Streptolysin S er ansvarlig for betahæmolysen, der forekommer i blodagar, og selv om den er giftig for visse celler i immunsystemet, er den ikke antigen. Mens streptolysin O, der er labilt mod ilt, er ansvarlig for hæmolysen, der forekommer under blodagaren, og dette er antigent.

Streptococcus pyogenes / Diagram over hvad der sker i ASTO-testen (agglutineringsreaktion). (Antistoffer bundet til latexpartikler, der indeholder det specifikke antigen). Kilde: Bruger: Graham Beards / Alejandro Porto

Når cellerne i immunsystemet interagerer med streptolysin O, produceres derfor en specifik immunrespons, der genererer aktiveringen af ​​B-lymfocytter. Disse celler producerer antistoffer rettet mod streptolysin O. Derfor kaldes antistofferne antistreptolysin O.

Streptococcus pyogenes producerer forskellige patologier, blandt dem: tonsillitis, erysipelas, impetigo, puerperal feber, skarlagensfeber og septikæmi. Anti-streptolysin O-antistoffer vises 8 til 30 dage efter infektionsstart.

De fleste af disse infektioner er meget almindelige i befolkningen, så det er almindeligt for folk at have antistreptolysin O-antistoffer i deres blod. Lavt titere indikerer en tidligere infektion med denne bakterie, men en høj eller stigende titre indikerer en nylig eller pågående infektion.

Kvantificering af antistreptolysin O-antistoffer

På laboratoriet kan anti-streptolysin "O" -antistoftiter måles gennem en serologisk test. Antistreptolysin O (ASTO) -testen er baseret på en agglutineringsreaktion med latex.

Det kan udføres semi-kvantitativt, rapportering i kryds eller titeren kan også kvantificeres. Det er normalt og ikke signifikant at finde værdier op til 200 IE / ml eller Todd-enheder / ml. Over denne værdi betragtes den som positiv og klinisk signifikant.

Denne test kræver ikke, at patienten skal faste. Serum bruges som en prøve, det vil sige, at patientens blod trækkes og anbringes i et rør uden antikoagulant og centrifugeres derefter for at opnå serumet.

Grundlag for ASTO-teknikken

Teknikken bruger latexpartikler som understøtning til at fikse streptolysin O-antigenet.De absorberede antigenpartikler omsættes med patientens serum. Hvis patienten har antistreptolysin O-antistof, vil disse binde til antigenet, der er bundet til latexpartiklen.

Denne binding forårsager en agglutination, der er makroskopisk synlig. Reaktionens intensitet er direkte proportional med koncentrationen af ​​tilstedeværende antistoffer.

Teknikker

- Semi-kvantitativ teknik

Reaktionens intensitet kan semi-kvantificeres i kryds. For at gøre dette tages en serologisk reaktionsplade og placeres:

50 µl serum og 50 µl ASTO-reagens. Bland det godt med en trætænder, og læg den i en automatisk mixer i 2 minutter. Observere. Hvis en automatisk rotator ikke er tilgængelig, skal den udføres manuelt.

Tolkning

Suspension uden klumper (ensartet): negativ

1. + = svag reaktion

2. ++ = let reaktion

3. +++ = moderat reaktion

4. ++++ = stærk reaktion

Sera, der er positive med 3 og 4 kryds, kan kvantificeres.

- Kvantitativ teknik

Til kvantificering af titeren foretages seriefortyndinger 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.

For at gøre dette skal du gøre som følger: 4 prøverør eller Kahn-rør tages, og 0,5 ml fysiologisk saltvand placeres på dem alle. Derefter sættes 0,5 ml patientserum til det første rør. Blandes godt. Dette rør svarer til 1: 2-fortynding.

Derefter overføres 0,5 ml til rør 2 og blandes godt. Dette rør svarer til 1: 4-fortynding og så videre, indtil den ønskede fortynding er nået.

Tag 50 pl af hver fortynding og reager med 50 pl ASTO-reagens på en agglutineringsplade, som forklaret i den semikvantitative teknik.

Tolkning

Den højeste fortynding, hvor synlig agglutination observeres, tages i betragtning. Beregningerne udføres som følger:

ASTO = Invers af den højeste positive fortynding x teknikens følsomhed (konstant).

Eksempel: Patient med positiv reaktion op til 1: 8

ASTO = 8 x 200 IE / ml = 1600 IE / ml eller Todd Units / ml.

Referenceværdi

Normal voksen: op til 200 IE / ml

Normale børn: op til 400 IE / ml

anbefalinger

Det anbefales, at der monteres en positiv og negativ kontrol med patienterne for at sikre, at reagenset er i optimal tilstand. Hvis den positive kontrol ikke agglutinerer, eller den negative kontrol agglutinerer, kan reagenset ikke bruges.

Reaktionen skal fortolkes efter 2 minutter, efter dette tidspunkt er den ikke gyldig, hvis der er agglutination. Dette er falske positiver.

Hyperlipemisk sera interfererer med reaktionen. De kan give falske positiver.

En isoleret ASTO-værdi er ikke meget nyttig. Det skal ledsages af symptomerne.

Derudover anbefales det at udføre mindst 2 ASTO-målinger, når der er mistanke om gigtfeber eller post-streptococcal glomerulonephritis for at demonstrere stigningen i antistreptolysin O-niveauer og således bekræfte diagnosen.

Patologier med høje antistreptolysin O-titere

Anti-streptolysin-antistoffer forøges efter at have lidt en Streptococcus pyogenes eller gruppe A ß-hæmolytisk Streptococcus-infektion.

Blandt dem er: akut faryngitis, skarlagensfeber, impetigo, erysipelas, puerperal feber og septikæmi.

Nogle patienter, der har lidt af nylige eller tilbagevendende streptokokkerinfektioner, kan udvikle autoimmune sygdomme som en efterfølger eller komplikation af post-streptokokkinfektion, såsom akut glomerulonephritis og gigtfeber.

Post streptokokker autoimmune sygdomme

Gigtfeber

Det er en inflammatorisk komplikation eller efterfølgelse, der kan optræde 1 til 5 uger efter at have haft en streptokokkinfektion. Antistreptolysin O-titere øges markant 4 til 5 uger efter sygdomsdebut.

En høj ASTO-titer guider diagnosen, men er ikke relateret til sygdommens sværhedsgrad, og dens fald indebærer ikke forbedring.

Antistreptolysin O-antistoffer krydsreagerer mod kollagen og muskelfibre, der påvirker visse organer (hjerte, hud, led og nervesystem, blandt andre).

Denne komplikation eller opfølgning forekommer ved hjerteanfald, feber, ubehag, ikke-suppurativ migrerende polyarthritis, chorea osv.

Akut glomerulonephritis

Akut glomerulonephritis er en ikke-suppurativ efterfølger, der opstår på grund af deponering af antigen-antistofkomplekser på den glomerulære kældermembran.

Dannelsen og cirkulationen af ​​antigen-antistof-komplekser (ag-ac) genereret af streptococcal-infektioner kan føre til ekssudative ændringer og betændelse i glomeruli med proteinuri og hæmaturi.

Disse ag-ac-komplekser aflejres i glomerulus og aktiverer komplementskaskaden, hvilket resulterer i glomerulær endotelskade. Af denne grund betragtes det som en autoimmun sygdom, da individets immunsystem skader sit eget væv.

Antistreptolysin O-antistoffer er meget høje og komplementniveauer er lave.

Referencer

1. Wiener Laboratories. ASO latex. 2000. Tilgængelig på: wiener-lab.com.ar
2. Wikipedia-bidragydere. "Anti-streptolysin O." Wikipedia, The Free Encyclopedia. Wikipedia, The Free Encyclopedia, 23. januar 2019. Web. 19. jul. 2019.
3. Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolysin O titer ved helbred og sygdom: niveauer og betydning. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. Fås på: ncbi.nlm.nih
4. Sen E, Ramanan A. Sådan bruges antistreptolysin O-titre. Arch Dis Child Educ Practice Ed. 2014; 99 (6): 231-8. Fås på: ncbi.nlm.nih
5. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. (5. udgave). Argentina, Redaktion Panamericana SA
6. González M, González N. 2011. Manual of Medical Microbiology. 2. udgave, Venezuela: Direktoratet for medier og publikationer fra University of Carabobo.