- Fundament og materialer
- materialer
- Steps
- Makroskopisk og mikroskopisk undersøgelse
- Original Faust-teknik
- Faust-teknik ved centrifugering
- Fordel
- Ulemper
- Referencer
The Faust teknik er en metode, der tillader koncentrationen af nogle æg og / eller larver af parasitter, der er indeholdt i fæces ved at flyde. Det bruges, når direkte coproparasitologiske test er negative, eller når du ønsker at få rene prøver uden detritus.
Koncentrationsmetoder til coproparasitological undersøgelser er af tre typer: ved flotation, ved sedimentation eller ved metoder, der kombinerer de to foregående. Disse metoder øger chancerne for positive resultater.
Skammel analyse.
Faust-metoden består af at blande en del af afføringsprøven med et stof, der er tættere end æggene eller parasitterne, der skal koncentreres. Dette bevirker, at de, når de er mindre tæt, flyder på overfladen. Supernatantvæsken opsamles og ses under et mikroskop til identifikation og kvantificering.
Denne metode bruges til at visualisere helminthæg. Samtidig har det vist sig at være en meget følsom metode til diagnose af Giardia lamblia, en flagelleret protoso, der er udbredt over hele verden. Flotationsmetoder anbefales ikke til meget tunge parasitæg såsom bændelorm og trematoder.
Parasitter er en af de mest udbredte tarminfektioner i hele verden, især i fattige lande med dårlige sanitære forholdsregler. Af denne grund er det meget nyttigt at diagnosticere og behandle at have følsomme metoder til at identificere og kvantificere disse parasitter.
Fundament og materialer
Teknikken er baseret på eksistensen af de forskellige specifikke tyngdekraften af æg, parasitter, cyster, larver og detritus ved anvendelse af zinksulfatopløsninger som en flotationsmetode.
Begrundelsen for teknikken er at blande prøven med en zinksulfatopløsning, der har en højere densitet end lettere æg, larver eller parasitter.
Dette gør det muligt for de tyngre elementer at udfælde og de lettere flyde, der vises i supernatanten efter centrifugering af prøverne.
materialer
Beholdere til samling af fækale prøver (Kilde: Bobjgalindo via Wikimedia Commons)
- Forbered en zinksulfatopløsning med en densitet på 1,18 eller 1,2 g / ml, hvis prøven tidligere blev behandlet.
- Forbered et reol med tidligere mærkede prøverør.
- Har en centrifugalmaskine.
- Har mikroskopglas og dækglas på hånden. Alle skal mærkes
- Sørg for, at der findes en Lugols løsning til at plette arkene.
- Har gasbind til at filtrere.
- Har tragte og destilleret vand.
- Find mærkede plast- eller papbeholdere.
- Også applikatorer og sterilt håndtag på 5 mm.
- En lettere til sterilisering af håndtaget.
Steps
Makroskopisk og mikroskopisk undersøgelse
Ved enhver afføringsundersøgelse begynder undersøgelsen med det, der kaldes "grov undersøgelse" af prøverne.
Konsistensen, farven, tilstedeværelsen af hvad der ser ud til at være blod, tilstedeværelsen af slim og tilstedeværelsen af voksne parasitter er beskrevet.
Derefter går vi videre til "mikroskopisk undersøgelse" af afføringen, dette afhænger af metoden. Den enkleste er metoden direkte smurt, som er den enkleste mikroskopiske observationsmetode for parasitter.
Fotografi af observationen af Gardia lamblia, en tarminparasit (Kilde: Riddlemaster via Wikimedia Commons)
Proceduren indebærer at placere en lille mængde af prøven direkte på et objektglas. Anbring flere dråber saltopløsning, der skal have størrelse i størrelsen som prøven. Bland saltopløsningen med afføringen, indtil der dannes en homogen blanding. Læg et dækglas og undersøge det under mikroskopet.
Original Faust-teknik
Den anden procedure består af Faust float-metoden, hvis originale version består af:
1- Anbring ca. to gram afføring i en egnet beholder til dette formål.
2- Tilsæt 30 ml zinksulfatflotationsopløsning, hvormed der fremstilles en emulsion ved at blande opløsningen med fæces.
3- Sil med en sil i en anden beholder og overfør til et reagensglas.
4- Tilføj mere flotationsopløsning, indtil der dannes en menisk i røret.
5- Læg et glas dækglas på menisken. Lad det hvile i 10 til 15 minutter.
6- Fjern dækglasset, og anbring det på et objektglas, der undersøges under et mikroskop.
Faust-teknik ved centrifugering
Oprindeligt anvendte metoden ikke centrifugering, men den er nu inkluderet, da der opnås bedre resultater. Teknikken involverer en række trin for at opnå en ordentlig procedure, disse er som følger:
1- fæces vaskes med vand, blandes godt og filtreres derefter med gasbind foldet i fire. Prøven anbringes i et reagensglas.
2- Centrifuge og fjern supernatanten (prøver, der holdes over vandet). Trin 1 og 2 gentages, indtil supernatanten er "klar".
3 - Zinksulfat tilsættes til den filtrerede og centrifugerede prøve.
4- Det blandes godt.
5- Centrifuge igen i 1 minut ved 2500 o / min (omdrejninger pr. Minut).
6- Supernatanten udvindes med en steril sløjfe på ca. 5 mm; rørene skal ikke rystes.
7- Prøven, der er udvundet fra supernatanten, anbringes på et objektglas, og en dråbe Lugol kan placeres til farve, dækglasset anbringes og observeres under et mikroskop.
8- Beholdere og reagensglas er mærket.
Fordel
- Elementerne, der bruges til diagnosen, kan ses rene og uden ”detritus”, hvilket letter observationen af arket og reducerer tiden, der bruges til diagnosen.
- I supernatanten udvindes både larver, æg og / eller cyster.
- Det er en meget lav pris metode.
- Proceduren er meget enkel og let at implementere.
- Diagnosen er hurtig og nøjagtig.
- På grund af vigtigheden og den høje forekomst af parasitose i fattige lande er disse lave omkostninger og brugervenlige metoder ideelle til diagnose og overvågning af disse patologier.
Ulemper
Flotationsopløsningens tæthed frembringer en sammentrækning af larverne, dvs. de krymper og kan i en meget kort periode deformeres. Dette tvinger undersøgeren til straks at stille diagnosen, og de behandlede prøver kan ikke opbevares til fremtidige undersøgelser.
Som med alle mikroskopiske identifikationsmetoder, kræves et meget erfarent undersøgende personale for at stille nøjagtige diagnoser.
Den hurtige deformation af de elementer, der er nødvendige for diagnosen, skønt de er en åbenbar ulempe, kan korrigeres ved at foretage øjeblikkelige mikroskopiske observationer.
Referencer
- Ananias, FL (2017). Evaluering af følsomheden af Faust-metoden og spontan sedimentation til diagnose af giardiasis. Cuban Journal of Tropical Medicine, 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Sammenlignende evaluering af en modificeret zinksulfat-flotationsteknik. Tidsskrift for klinisk mikrobiologi, 7 (6), 524-528.
- Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Følsomhed og effektivitet af udvalgte coproscopical-metoder-sedimentation, kombineret zinksulfat-sedimentation-flotation og McMaster-metode. Parasitology research, 115 (7), 2581-2587.
- Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW,… & Visvesvara, G. (2018). Laboratoriediagnostik af parasitter fra mave-tarmkanalen. Kliniske mikrobiologiske anmeldelser, 31 (1), e00025-17.
- Summers, WA (1942). En modifikation af zinksulfatcentrifugalflotationsmetode til genvinding af helminth-æg i formaliseret fæces. Journal of Parasitology, 28 (4), 345-346.