HVAD ER ENKEL FARVNING? FREMRAGENDE FUNKTIONER - BIOLOGI - 2025

Den enkelte farvning er en hurtig og enkel farvningsprocedure, hvor der anvendes et enkelt farvestof, så det kaldes enkelt. Det bruges hovedsageligt til at bestemme morfologien og organiseringen af ​​cellerne, der er til stede i en prøve.

Celler er naturligvis farveløse, så det er nødvendigt at gøre dem synlige på en eller anden måde, når de ses under mikroskopet.

Humane kindceller farvet ved simpel methylenblå farvning.

Det er vigtigt at bemærke, at de farvestoffer, der bruges til enkel farvning, skal være basale med en positiv ladning (kationisk), så de spontant kan binde til cellevæggen og cytoplasmaet.

Disse cellulære strukturer er negativt ladede. Dette er grunden til, at det positivt ladede farvestof tiltrækkes af celler og binder spontant til dem. Således farves alle celler, der er til stede i en prøve, hurtigt.

Farvestoffer anvendt til enkel farvning

Der er flere grundlæggende pletter, der kan bruges i mikrobiologilaboratoriet. De mest anvendte er:

- Methylenblå.

- Krystallviolet.

- Malachitgrøn.

- Grundlæggende fuchsin.

Alle disse farvestoffer fungerer godt i bakterier, fordi de har positivt ladede (kationiske) farveioner (kromoforer).

Farvningstiderne for de fleste af disse pletter er relativt korte. De varierer generelt fra 30 sekunder til 2 minutter, afhængigt af farvestoffets affinitet.

Det er vigtigt at huske på, at den inden farvning af en prøve ved simpel farvning skal forlænges og fastgøres til glideskinne (objektglas); den udvidede og faste prøve kaldes en udstrygning.

De 6 trin til enkel farvning

Trin 1

Placer objektglasset på et farvningsstativ, og anvend den ønskede plet. Lad den tilsvarende tid handle.

Normalt enkel farvning tager et par sekunder til et par minutter, afhængigt af den anvendte plet.

Observation

I dette trin er det vigtigt ikke at overskride den anbefalede tid for det anvendte farvestof, da der kan dannes krystaller på arket, hvilket frembringer såkaldte "artefakter", der forvrider cellernes morfologi.

Trin 2

Vask grundigt udstrygningen fra objektglasset med destilleret vand fra en flaske, eller også langsomt strømmende ledningsvand, indtil afstrømningen bliver klar. Dette tager normalt 5-10 sekunder.

Observation

Påfør ikke vandstrømmen direkte på udstrygningen for at undgå, at kraften af ​​den samme skader prøven.

Hvis du ikke har destilleret vand, kan du bruge ledningsvand uden problemer, da det ikke vil påvirke resultatet af farvningen.

Trin 3

Skub objektglasset med absorberende papirhåndklæder i en retning og uden at gnide. Sørg for, at undersiden af ​​objektglasset er ren.

Trin 4

Iagttag den farvede udtværing under mikroskopet. Start med de mest fjerne mål for korrekt lokalisering af det område, du vil observere mere detaljeret. Skift mål for at komme nærmere og tættere på prøven.

Observation

Til brug af objektivet med en højere forstørrelse (normalt 100X) bør nedsænkningsolie anvendes, da dette hjælper lyset med at trænge bedre ind, og billedet ser skarpere ud. Det er ikke nødvendigt at bruge et dækglas.

Trin 5

Til sidst bortskaffes alle prøver i en passende beholder, der er korrekt mærket "biohazard".

Referencer

1. (2001). Mikrobiologiske Applikationer: Laboratory Manual i General Microbiology (8 ^th ed.). McGraw-Hill-selskaberne.
2. Harisha, S. (2006). En introduktion til praktisk bioteknologi (1. ^st). Firewall Media.
3. Moyes, RB, Reynolds, J., & Breakwell, DP (2009). Foreløbig farvning af bakterier: Enkle pletter. Aktuelle protokoller i mikrobiologi, (SUPPL. 15), 1–5.
4. Pommerville, J. (2013). Alcamos Fundamentals of Microbiology Laboratory (10 ^th). Jones & Bartlett Learning.
5. Prescott, H. (2002). Laboratory Øvelser i Microbiology (5 ^th). McGraw-Hill-selskaberne.
6. Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Principper for mikrobiologi (1. ^st). Tata McGraw-Hill Uddannelse.