MØRKET FELTMIKROSKOP: EGENSKABER, DELE, FUNKTIONER - BIOLOGI - 2025

Det mørke feltmikroskop er et specielt optisk instrument, der bruges i visse laboratorier. Dette er resultatet af en ændring foretaget til lysfeltmikroskopi. Darkfield-mikroskopi kan udføres ved trans-illumination eller ved epi-illumination.

Den første er baseret på at blokere de lysstråler, der når kondensatoren direkte, ved hjælp af enheder, der interponerer, før lysstrålene når kondensatoren.

Mørkefeltmikroskop / Treponemer set i mørke feltmikroskop. Kilde: Dietzel65 / Judith Miklossy, Sandor Kasas, Anne D Zurn, Sherman McCall, Sheng Yu og Patrick L McGeer

Det mørke felt med transmitteret lys gør det muligt at fremhæve strukturerne og være i stand til at observere ekstremt tynde partikler. Strukturer ses med en vis brydning eller lysstyrke på en mørk baggrund.

Mens epi-belysningseffekten opnås med indfaldende eller skråt lys. I dette tilfælde skal mikroskopet være udstyret med et specielt halvmåneformet filter.

Med hændende belysning er de observerede strukturer kendetegnet ved at præsentere en visuel virkning i høj lettelse. Denne egenskab gør det muligt at fremhæve kanterne på de suspenderede partikler.

I modsætning til Brightfield-mikroskopi er darkfield-mikroskopi især nyttigt til visualisering af fresker, der indeholder suspenderede partikler, uden nogen form for farvning.

Det har imidlertid flere ulemper, herunder at det ikke kan bruges til tørre præparater eller farvede præparater. Det har ikke en god opløsning. For at sikre et godt billede kan den numeriske åbning af målene desuden ikke overstige kondensatorens.

egenskaber

Sammensætningen af ​​det mørke feltmikroskop præsenterer vigtige ændringer med hensyn til det lyse felt, da de grundlæggende elementer i begge mikroskopier er modsatte.

Mens der i det lyse felt er lysstrålerne koncentreret, så de passerer direkte gennem prøven, i bjergene er det spredt, så kun de skrå bjælker når prøven. Disse spredes derefter af den samme prøve, hvilket overfører billedet mod målet.

Hvis du skulle fokusere på et lysbillede uden en prøve, ville en mørk cirkel blive observeret, da uden en prøve er der intet at sprede lyset mod målet.

For at opnå den ønskede effekt i det synlige felt kræves brugen af ​​specifikke kondensatorer samt membraner, der hjælper med at kontrollere lysstrålene.

I et mørkt synsfelt virker elementerne eller partiklerne i suspension lyse og brydende, mens resten af ​​feltet er mørkt, hvilket giver en perfekt kontrast.

Hvis der anvendes skråt eller hændende lys, opnås en kanteffekt med stor relieff i de observerede strukturer.

Dele af mørkefeltmikroskopet

Kilde: amazon.com

-Mekanisk system

Rør

Det er den enhed, gennem hvilket billedet reflekteres og forstørres af objektivet, bevæger sig, indtil det når okularet eller okularerne.

Røre

Det er støtten, hvor de forskellige mål er placeret. Målene er ikke faste, de kan fjernes. Revolveren kan drejes på en sådan måde, at målet kan ændres, når operatøren har brug for det.

Makroskrue

Denne skrue bruges til at fokusere prøven, den bevæges fremad eller bagud for at flytte prøven nærmere eller længere væk fra målet, og bevægelsen er grotesk.

Mikrometer skrue

Mikrometerskruen bevæges fremad eller bagud for at bevæge prøven nærmere eller længere væk fra målet. Den mikrometriske skrue bruges til meget fine eller sarte bevægelser, næsten umærkelig. Det er den, der opnår det ultimative fokus.

Platen

Det er understøttelsen, hvor prøven hviler på diaset. Det har en central åbning, gennem hvilken lysstrålene passerer. Når makro- og mikrometerskruerne flyttes, går scenen op eller ned, afhængigt af skruens bevægelse.

Bilen

Vognen gør det muligt at krydse hele prøven med målet. De tilladte bevægelser er frem og tilbage og vice versa og fra venstre til højre og vice versa.

Hold pincet

Disse er placeret på scenen, er lavet af metal og er beregnet til at holde glideren for at forhindre, at den rulles under observation. Det er vigtigt, at prøven forbliver fast, mens den observeres. Fastgørelseselementerne er nøjagtigt store til at modtage objektglasset.

Arm eller håndtag

Armen forbinder røret med basen. Det er det sted, hvor mikroskopet skal holdes, når det skal flyttes fra den ene side til den anden. Med den ene hånd gribes armen fast, og basen holdes med den anden hånd.

Bund eller fod

Som navnet antyder er det basen eller understøttelsen af ​​mikroskopet. Takket være basen er mikroskopet i stand til at forblive fast og stabilt på en plan overflade.

-Optisk system

mål

De er cylindriske i form. De har en linse i bunden, der forstørrer det billede, der kommer fra prøven. Målene kan være af forskellige forstørrelser. Eksempel: 4,5X (forstørrelsesglas), 10X, 40X og 100X (nedsænkningsmål).

Nedsænkningsmål er navngivet således, fordi det kræver placering af et par dråber olie mellem objektivet og prøven. De andre kaldes tørre mål.

Målene udskrives med de egenskaber, de har.

Eksempel: fabrikantens brand, feltkurvurskorrektion, afvigelseskorrektion, forstørrelse, numerisk blænde, specielle optiske egenskaber, nedsænkningsmedium, rørlængde, brændvidde, dækglassens tykkelse og kodering farve.

Linserne har en frontlinse placeret i bunden og en bagerste linse placeret øverst.

Okularer

Gamle mikroskoper er monokulære, det vil sige, de har kun et okular, og moderne mikroskoper er kikkert, det vil sige, de har to okularer.

Okularerne er cylindriske og hule i form. Disse har konvergerende linser inde, der udvider det virtuelle billede, der er oprettet af linsen.

Okularet slutter sig til røret. Sidstnævnte gør det muligt for billedet, der transmitteres af målet, at nå okularet, hvilket vil forstørre det igen.

Okularet i dets øverste del indeholder en linse, der kaldes et okular, og i sin nedre del huser det en linse, der kaldes en samler.

Den har også en membran, og afhængigt af hvor den er placeret vil den have et navn. De, der er placeret mellem begge linser kaldes Huygens okular, og hvis det er placeret efter de 2 linser kaldes det Ramsden okular. Selvom der er mange andre.

Forstørrelsen af ​​okularet spænder mellem 5X, 10X, 15X eller 20X, afhængigt af mikroskopet.

Det er gennem okularet eller okularerne, at operatøren kan se prøven. Nogle modeller har en ring på venstre okular, der er bevægelig og tillader billedjustering. Denne justerbare ring kaldes en diopterring.

-Belysningssystem

Lampe

Det er kilden til belysning og er placeret i bunden af ​​mikroskopet. Lyset er halogen og udsendes fra bunden op. Generelt er lampen, som mikroskoper har, 12 V.

Mellemgulv

Membranen i mørke feltmikroskoper mangler en iris; i dette tilfælde forhindrer dette strålerne fra lampen i at nå direkte til prøven, kun de skrå bjælker vil berøre prøven. De bjælker, der er spredt af strukturer, der er til stede i prøven, er de, der vil passere målet.

Dette forklarer, hvorfor strukturer ser lyse og lysende ud i et mørkt felt.

Kondensator

Kondensatoren i et mørkt feltmikroskop adskiller sig fra det i et lyst felt.

Der er to typer: brydningskondensatorer og refleksionskondensatorer. Sidstnævnte er til gengæld opdelt i to kategorier: paraboloider og cardioider.

Brydningskondensatorer

Denne type kondensator har en skive, der er anbragt for at bryde lysstråler, den kan placeres over frontlinsen eller på bagsiden.

Det er meget let at improvisere en kondensator af denne type, da det er nok at placere foran kondensatorens frontlinser en skive lavet af sort pap, der er mindre end objektivet (membran).

Et lysfeltmikroskop kan konverteres til et mørkefeltmikroskop ved hjælp af dette tip.

Refleksionskondensatorer

Det er dem, der bruges af stereoskopiske mikroskoper. Der er to typer: paraboloider og cardioider.

• Paraboloider: De har en type krumning kaldet paraboloider på grund af deres lighed med en parabola. Denne type kondensator bruges i vid udstrækning til undersøgelse af syfilis, da den gør det muligt at observere Treponeme.
• Kardioid: kondensatorens krumning svarer til et hjerte, deraf navnet "kardioid", kondensatoren har samme navn. Den har en membran, der er justerbar.

Funktioner

-Det bruges til at undersøge tilstedeværelsen af ​​Treponema pallidum i kliniske prøver.

-Det er også nyttigt at observere Borrelias og Leptospira.

-Det er ideelt til at observere in vivo-opførsel af celler eller mikroorganismer, så længe det ikke er nødvendigt at specificere specifikke strukturer.

-Det er ideelt at fremhæve kapslen eller væggen i mikroorganismer.

Fordel

-Markmikroskoper med en brydningskondensator er billigere.

-Den brug er meget nyttig i 40X forstørrelse.

-De er ideelle til at observere prøver, der har et brydningsindeks svarende til det medium, hvor de findes. F.eks. Celler i kultur, gær eller mobile bakterier, såsom spirocheter (Borrelias, Leptospiras og Treponemas).

-Cellen kan observeres in vivo, som tillader evaluering af dens opførsel. F.eks. Brownsk bevægelse, bevægelse ved flagella, bevægelse ved udsendelse af pseudopoder, mitotisk opdelingsproces, klækning af larver, spiring af gær, fagocytose, blandt andre.

-Det gør det muligt at fremhæve kanterne på strukturer, for eksempel kapsel og cellevæg.

-Det er muligt at analysere opdelte partikler.

-Brug af farvestoffer er ikke nødvendigt.

Ulemper

-Særlig forsigtighed skal udvises, når præparaterne monteres, da hvis de er for tykke, overholdes de ikke godt.

-Opløsningen af ​​billederne er lav.

-Markmikroskop, der bruger brydningskondensatorer, har en meget lav procentdel af lysstyrke.

-For at forbedre billedkvaliteten med et nedsænkningsmål (100X) er det nødvendigt at reducere den numeriske åbning af målsætningerne og således øge den for den lysende kegles. Til dette er inkorporering af en ekstra membran, der kan regulere objektets numeriske åbning, væsentlig.

-Du kan ikke visualisere tørre præparater eller farvede præparater, medmindre det er vitale farvestoffer.

-Det tillader ikke visualisering af visse strukturer, især interne strukturer.

-Markmikroskop er dyre.

Referencer

1. "Mørkefeltmikroskop." Wikipedia, The Free Encyclopedia. 26. august 2018, 00:18 UTC. 30. juni 2019, 01:06
2. Agudelo P, Restrepo M, Moreno N. Diagnose af leptospirose fra blodprøver og kultur ved observation under et mørkt feltmikroskop. Biomedical. 2008; 28 (1): 7-9. Tilgængelig fra: scielo.org
3. Rodríguez F. Typer af optiske mikroskoper. Klinisk og biomedicinsk laboratorieblog. Fås på: franrzmn.com
4. Wikipedia-bidragydere. Mørkefeltmikroskopi. Wikipedia, The Free Encyclopedia. 19. oktober 2018, 00:13 UTC. Fås på: wikipedia.org
5. Bhatia M, Umapathy B, Navaneeth B. En evaluering af mikroskopi af mørk felt, kultur og kommercielle serologiske sæt til diagnosticering af leptospirose. Indiske J Med Microbiol. 2015; 33 (3): 416-21. Fås på: nlm.nih.gov