BAKTERIOLOGISK SLØJFE: EGENSKABER, TYPER, ANVENDELSER - BIOLOGI - 2025

Den bakteriologiske sløjfe er et arbejdsinstrument brugt af mikrobiologer til såning af mikrobielle kulturer (bakterier eller svampe). Det er måske det instrument, der mest bruges af disse fagfolk.

Dets anvendelse virker enkel, men i virkeligheden kræver det meget træning. Før start med såning, skal løkken steriliseres i Bunsen-brænderen, derefter tages det mikrobielle inokulum, der kan komme fra en flydende kultur eller en fast kultur.

Typer af bakteriologiske sløjfer. Kilde: Ingen maskinlæsbar forfatter leveret. ば や お antaget (baseret på ophavsretskrav).

Når inokulumet er taget, kan det aflejres i et flydende medium eller podes i et fast medium. Efter hver procedure steriliseres løkken igen. Håndtaget er også velegnet til fremstilling af mikrobielle udstrygninger på et objektglas.

Den bakteriologiske sløjfe har mange navne, herunder: platineløkke eller -løkke, inokulationssløjfe eller frøsløjfe, men dets rigtige navn er Kohle-løkke.

Det materiale, som håndtaget er lavet med, er generelt en nikkel-chrom (nichrom) legering eller platin. En anden sort, der findes på markedet, er de engangsbakteriologiske sløjfer til plast.

På den anden side er der flere typer bakteriologiske sløjfer, som hver udfører en funktion inden for de opgaver, der udføres af en mikrobiolog. Valget af håndtag afhænger af, hvad der skal gøres.

For eksempel til at udføre et striatum ved udtømning for at isolere en mikroorganisme bruges platinuslyngen, som ender i en lukket ring, uanset om den er kalibreret eller ej.

Mens det er at så en urinprøve, hvor det er vigtigt at kvantificere CFU'er, er det nødvendigt at bruge den kalibrerede sløjfe. Til inokulering af biokemiske tests, der kræves sået ved punktering, er nålens sløjfe vigtig. Det er vigtigt, at håndtaget håndteres af uddannet personale.

egenskaber

Bakteriologiske sløjfer består af to ekstremer. Den ene ende svarer til håndtaget eller basen, mens den anden ende er selve håndtaget.

Håndtag bund eller håndtag

Basen tjener til at gribe grebet under håndtering. Det er normalt metallisk, men har en varmeisolator for at forhindre, at operatøren brændes, når spidsen af ​​håndtaget steriliseres på lighteren. Den måler cirka 20 cm, selvom den kan være længere. Den har en gevind til justering af håndtaget.

Håndtere

Det er den funktionelle ende, det vil sige det er den del, der kommer i kontakt med mikroorganismer og med kulturmediet. Det består af en fin tråd, der indsættes i basen.

Håndtaget kan være lavet af nichrom eller platin, og det kaldes derfor undertiden et platinhåndtag. Den er cirka 6,5 ​​cm lang og har en måler på ca. 0,20 mm. Håndtaget med håndtaget kan måle 26,5 cm. Målingerne kan variere fra producent til producent.

typer

Der er flere typer bakteriologiske sløjfer, og hver har en bestemt anvendelse. Håndtagstyperne er som følger: kalibreret ringformet håndtag, ukalibreret ringformet håndtag, lige eller nålehåndtag, spatulat håndtag, “L” -formet håndtag og skarptippet håndtag.

På den anden side kan håndtagene være permanente eller disponible. De til permanent anvendelse er steriliseret i lighteren, de kan genanvendes og meget holdbare. Mens engangsartikler er sterile fra fabrikken, bruges de kun én gang og kasseres.

Applikationer

Ringhåndtag, ikke kalibreret

Det er det mest anvendte håndtag i mikrobiologilaboratoriet. Det bruges til at tage et inokulum fra en mikrobiel suspension (flydende medium) eller en del af kolonien (fast medium), der skal podes i et andet kulturmedium, enten en biokemisk test eller et mere beriget eller selektivt medium, som tilfældet kan være. Det er også nyttigt til fremstilling af mikrobielle udstrygninger på et objektglas.

Med denne type løkke kan den indledende inokulum strebes. Det er også designet, så det glider glat på agaren uden at beskadige det. Naturligvis kræver dette et uddannet personale til at håndtere såteknik, anvende den korrekte kraft og bevægelser for at gøre en god striation.

Forskellige podeteknikker kan udføres med dette håndtag. Eksempelvis udsættes faste medier i petriskåle normalt ved udmattelse (der er flere teknikker, se video 1).

Denne teknik er beregnet til at opnå isolerede kolonier for at studere og identificere dem, især når prøven er polymikrobiel, dvs. kulturen ikke er ren (den indeholder mere end en type mikroorganisme).

I stedet plantes kilerne i en simpel zigzag for at opnå bakteriemasse, hvilket ikke er nødvendigt i dette tilfælde for at isolere kolonier.

Nogle gange bruges de også til at tage bestemte prøver. For eksempel brugte Rojas et al. Den bakteriologiske sløjfe til at opsamle skrabet vaginalvævsprøver fra rotter.

Bakteriologisk sløjfe med ringspids, ikke kalibreret. Kilde: Pixinio.com

Ringformet håndtag, kalibreret

Dette håndtag, som navnet antyder, er kalibreret til at tage en bestemt mængde mikrobiel suspension. Det bruges, når det er nødvendigt for inokulatet at overholde det, der er standardiseret inden for teknikken.

For eksempel er det meget almindeligt at plante urinkulturer. I dette tilfælde kan en 0,01 ml og en 0,001 ml kalibreret sløjfe anvendes.

Det skal bemærkes, at kalibrerede håndtag har en fejlmargin, der varierer afhængigt af den vinkel, hvormed prøven udtages, og størrelsen på beholderens munding.

Hvis 0,001 ml-sløjfen indsættes lodret i en beholder med en lille mund (≤ 7 mm), vil den mængde, der er taget, være 50% mindre end ønsket.

Dette sker, fordi jo mindre diameteren på beholderens munding er, jo højere er overfladespændingen, og derfor øges vedhæftningskræfterne mellem (glas - væske). Dette medfører, at væskeladningen, der tages af håndtaget, er mindre.

Der henviser til, at hvis det tages i en vinkel på 45 ° i en beholder med en bred mund (≥ 22 mm), kan 150% mere end den krævede mængde opsamles. I dette tilfælde er overfladespændingen lavere, og glas / plastisk samhørighedskræfter falder, mens væske-væske-samhørighedskraften øges.

På grund af ovenstående foretrækkes undertiden andre metoder til kvantificering af kolonidannende enheder til urinkulturer.

Lige eller nålehåndtag

Det kaldes også et gevindhåndtag. Det bruges til at inokulere visse biokemiske test, især dem, der kræver podning ved hjælp af punkteringsteknikken. Eksempel semi-faste medier, der er fremstillet i form af en blok, såsom: SIM, MIO og O / F-medium.

Desuden er det i tilfælde af MIO og SIM, der vurderer bevægelighed, vigtigt, at punkteringen udføres med en nåleslynge, da fortolkningen af ​​en positiv motilitet opstår, når bakterierne vokser mod siderne af det indledende inokulum.

En test, der er inokuleret med en løkke, kan forfalske resultater (falsk positive). Af denne grund skal man ved denne type podning sørge for, at punkteringen er unik, og at når den fjernes, den kommer ud i samme retning, som den gik ind.

En anden test, der skal podes med nålen, selvom den er forberedt i en kileform, er Kligler. I denne test anbefales det ikke, at ilt trænger dybt ind i agaren, da der kræves et iltfattigt medium for, at visse kemiske reaktioner kan forekomme. Dette håndtag bruges også til at røre ved en bestemt koloni med henblik på subkultur.

Spatulere håndtag

De fleste mikroorganismer giver bløde, let at kaste kolonier. Der er dog nogle mikrobielle midler, hvis kolonier er hårde og tørre, for eksempel mycobakterier generelt og nogle svampe. I disse tilfælde er det nyttigt at bruge spatulat håndtaget.

"L" formet håndtag

Dets hyppigste anvendelse er at kæmpe svampekulturer, især skimmelsvampe.

Skarpt spidshåndtag

Det er nyttigt til at tage meget små kolonier til stede i polymikrobielle kulturer for at være i stand til at subkulturere dem.

Såningsteknikker

Video 1

Sterilisering af platinhåndtaget

Håndtaget skal steriliseres før og efter brug. For at sterilisere den bakteriologiske sløjfe i lighteren, skal du gøre som følger: håndtaget skal placeres øverst på flammen ved at indtage en position så lodret som muligt på en sådan måde, at den steriliseres fra spidsen op.

Når det fine glødetråd bliver lyserødt, kan det siges at være sterilt. For at bruge det afkøles det, og den valgte prøve udtages. (Se video 2).

Sterilisering af den bakteriologiske sløjfe

Video 2

Referencer

1. "Bakteriologisk løkke" Wikipedia, The Free Encyclopedia. 23 jul. 2019, 13:31 UTC. 18. august 2019, 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Kalibrerede metalhåndtag til mikrobiologer: Et alternativ til national produktion. Soc. Kom. Microbiol. 2010; 30 (1): 37-42. Tilgængelig på: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott mikrobiologisk diagnose. 12 udg. Redaktionel Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologisk diagnose. 5. udg. Redaktionel Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, et al. Bestemmelse af den smertestillende virkning af hexanekstrakt fra Eupatorium arsenei-blomster i en akut smertemodel hos rotter. mex. videnskab. gård. 2015; 46 (1): 64-69. Fås på: scielo.org