BLODKULTUR: HVAD ER DET TIL, GRUND, PROCEDURE, RESULTATER - BIOLOGI - 2025

Den blodkultur er en bakteriologisk test, der søger at påvise tilstedeværelsen af mikroorganismer i blodet. Blod er en steril væske af natur og skal derfor holdes under fysiologiske forhold, så tilstedeværelsen af ​​bakterier eller svampe i blodet er altid patologisk.

Når bakterier eller svampe findes i blodet, men multiplikationen ikke overstiger eliminering af mikroorganismer med immunsystemet, kaldes det bakteræmi (for bakterier) eller fungæmi (for svampe); Men hvis mikroorganismerne øges ukontrolleret i antal, kaldes det septikæmi.

Bloddyrkningsflasker (gul: pædiatrisk aerobiose, grøn: voksen aerobiose og rød: voksen anaerobiose). Kilde: fotografi taget af forfatteren MSc Marielsa Gil.

Bakteræmi, fungæmi og septikæmi udgør en fare for patientens liv og skal derfor behandles øjeblikkeligt. Derfor anmoder lægerne om blodkulturundersøgelse, når der er mistanke om infektion i blodet.

Denne bakteriologiske analyse giver mulighed for at vide, om der er en infektion i blodet eller ikke, og hvilken mikroorganisme der er involveret. Hvis det er positivt, udføres der desuden en følsomhedstest for at vide, hvilket antibiotikum eller svampedræbende middel, der kunne bruges i behandlingen.

Hvis blodkulturen på den anden side er negativ ved 24 timers inkubation, bør den ikke kasseres, før den er negativ i 240 timer. Dette sikrer, at der ikke er langsomtvoksende mikroorganismer.

For at en blodkultur skal være pålidelig skal ekstreme aseptiske forholdsregler træffes, når prøven udtages, og for at øge testens pålidelighed og følsomhed skal der udtages mindst to prøver under eller i nærheden af ​​febertoppen.

Hvad er det for?

Blod er en steril væske, og når mikroorganismer findes i det, er det 100% patologisk. Denne situation repræsenterer et meget delikat klinisk billede, der går på kompromis med patientens liv.

Blodkultur er en vigtig bakteriologisk test, der detekterer tilstedeværelsen af ​​mikroorganismer i blodbanen.

Mikroorganismerne kan nå blodet gennem forskellige ruter, som kan være ekstravaskulære infektioner, såsom: lungebetændelse, intra-abdominale infektioner, pyelonephritis, alvorlige hudinfektioner, blødt væv eller gigt, blandt andre.

Eller det kan også ske intravenøst, for eksempel kontaminering af intravenøse eller arterielle katetre, endokarditis, intravenøs medikamentafhængighed, administration af kontaminerede medikamenter eller opløsninger osv.

Detektering og behandling af det forårsagende middel til sepsis i tide er afgørende for at sikre patientens overlevelse.

I denne forstand skal lægen indikere realiseringen af ​​en blodkultur, når han observerer tegn og symptomer, der antyder septikæmi, såsom: feber (større end 38 ° C) uden et tilsyneladende infektiøst fokus eller tværtimod hypotermi (<de 36 ° C).

Andre tegn kan være: kulderystelser, forøget antal leukocytter (> 10.000 celler / mm ³) eller signifikant fald i polymorphonukleære celler (<1.000 PMN / mm ³). Såvel som multiorgan forringelse eller tab af vitalitet pludselig, blandt andre advarselstegn.

Bakteræmi kan være konstant, kortvarig eller intermitterende. Dette er vigtigt, når man tager en prøve, da det er nødvendigt at tage det, når der er større sandsynlighed for at finde mikroorganismen, der cirkulerer.

Derfor anbefales det at tage mindst 2 prøver forskellige steder. Derudover er idealet, at prøven udtages i feberrige toppe, eller når patienten udviser rysten, ekstrem hypotermi, sved eller tachycardi.

For at blodkultur skal være et virkelig nyttigt værktøj, skal prøven dog tages med ekstrem omhu. En dårlig manipulation eller dårlig asepsis i det øjeblik, prøven udtages, kan ugyldige testen og opnå falske positiver.

Basis

Undersøgelsen består af at tage to eller tre blodprøver aseptisk og anbringe den i specielle flasker.

Specielle apparater til dyrkning af blodprøver kaldes blodkulturflasker. Disse er klassificeret i:

I henhold til patientens alder

-Pædiatrisk brug

-For voksne.

I henhold til typen af ​​mikroorganisme

-Flasker til aerobe mikroorganismer (aerobe bakterier, fakultative bakterier og svampe).

-Kulturflasker til anaerobe mikroorganismer (strenge anaerobe bakterier).

Nogle indeholder et flydende kulturmedium, og andre indeholder et fast og flydende kulturmedium på samme tid. De findes også med aktiverede kulpartikler.

Behandle

Anbefalinger til prøveudtagning

- Prøven, der skal udtages af højtuddannet og trænet personale inden for mikrobiologi.

- Asepsis eller grundig rengøring af prøveopsamlingsstedet er uden tvivl det vigtigste trin.

- Som med al prøveudtagning skal sundhedspersonale fuldt ud overholde biosikkerhedsforanstaltningerne under processen (brug af handsker, kjole, briller, blandt andre).

- Pas på, at alle de nødvendige redskaber til udtagning af prøver er tilgængelige.

- Mærk hætteglassene med patientens fulde navn, dato, medicinske journalnummer, prøveopsamlingstid og laboratoriesekvensnummer.

-Dealet er at tage prøven, inden patienten begynder antimikrobiel terapi. Det er kun indikeret i tilfælde af, at den igangværende behandlings manglende funktion mistænkes. I dette tilfælde skal prøven udtages inden lægemiddelskiftet ved hjælp af blodkulturflasker med antibiotiske hæmmere (aktivt kulpartikler).

- Der skal udtages mindst 2 prøver på forskellige anatomiske steder, f.eks. Højre arm og venstre arm. Ved mistanke om endokarditis anbefales 3 prøver. To flasker vil blive inkluderet i hver prøve (en til aerobiose og en til anaerobiose).

Prøvemængde

Mængden af ​​prøve varierer afhængigt af patientens alder, men forholdet 1: 5 til 1:10 skal altid opretholdes med hensyn til fortynding af blod / kulturbuljong.

Hos nyfødte er den anbefalede prøvemængde 1 ml blod pr. Hætteglas. Pædiatrisk flaske bruges.

For spædbørn mellem en måned og et år kan det øges til 1,5 ml blod pr. Flaske. Pædiatrisk flaske bruges.

Hos børn over 2 år er den passende prøvemængde 2,5 ml blod pr. Hætteglas. Pædiatrisk flaske bruges.

Fra ungdomsårene kan det øges til et blodvolumen mellem 5 - 10 ml pr. Flaske. En voksen flaske bruges.

Endelig i voksenstadiet er den nødvendige mængde 8-10 ml pr. Flaske. En voksen flaske bruges.

Prøveudtagning

- Blodprøven kan være venøs eller arteriel. Imidlertid tages arterielt blod kun, når venøs prøveudtagning er umulig.

- Det anbefales ikke at tage en prøve fra et centralt venekateter, medmindre:

1. Det er umuligt at tage prøven perifert (venøs eller arteriel).
2. Patienter med risiko for blødning.
3. Når lægen mistænker bakteræmi på grund af kontaminering af det centrale venekateter.
4. Når feberen vises igen efter en feberophør på 4 til 5 dage, uanset om patienten er i antimikrobiel behandling eller ej.

Asepsis før prøvetagning

- Vælg de anatomiske steder til prøveudtagning. Generelt vælges vener af det bedste kaliber (basilikum eller kefal vene).

- I henhold til Centers for Disease Control (CDC) i Atlanta (USA), skal operatøren vaske hænderne med 2% chlorhexidin eller 10% povidonjod inden prøveudtagning ud over at have handsker på.

-Placér og find den vene, der skal bruges.

-Rengør punkteringsområdet på en roterende måde, foretag bevægelser fra midten udad ved hjælp af sæbe-chlorhexidin eller antiseptisk sæbe. Skyl med sterilt saltvand.

Påfør derefter et antiseptisk middel, og lad det handle. Eksempel chlorhexidingluconat 0,5% i 1 minut eller povidoniod 10% i 2 minutter. For sidstnævnte skal du først spørge, om patienten er allergisk over for jod. Hvis du er allergisk, kan du erstatte 70% alkohol.

Prøveekstraktion

- Placer turneringen for at forværre blodgennemstrømningen og spire venen.

- Rør ikke ved punkteringsstedet med fingeren igen. Hvis dette er strengt nødvendigt, skal fingeren vaskes på samme måde som punkteringsområdet.

-Sæt injektionsnålen eller hovedbunden i venen, og ekstraher den nødvendige mængde blod.

-Sæt ikke bomuld eller gasbind på nålen, når du fjerner den, hvis den ikke er steril.

-Fjern sikkerhedsforseglingen fra flaskerne meget omhyggeligt og uden at røre ved hætten. Nogle forfattere anbefaler, at der udføres en desinfektion af hætten, inden prøven inokuleres.

- Fordel den passende mængde blod i hætteglassene. Hvis prøven udtages med en injektor, hældes først den nødvendige mængde i den anaerobe kolbe og derefter i den aerobe kolbe. Hvis indtagelsen sker med hovedbund (sommerfugl), hældes den på den modsatte måde.

- Bland blodkulturflasken forsigtigt ved inversion.

- Skift handsker, og gentag de foregående trin til den anden prøvesamling.

-Hvis den anden prøve er taget fra et andet sted, kan det udføres med det samme, men hvis det er fra det samme sted, skal du vente 30 til 90 minutter mellem en prøve og en anden.

- Prøven skal tages til laboratoriet så hurtigt som muligt, hvis dette ikke er muligt, skal det efterlades ved stuetemperatur i op til 18 timer.

Kultur

Når kolberne først er i laboratoriet, inkuberes ved 37 ° C under betingelserne for hver kolbe, dvs. i henholdsvis aerobiosis og anaerobiosis.

Under den manuelle metode skal ringingen startes ved 24 timers inkubation og derefter ringe inter-dagligt. Ringerne udføres som følger: først desinficeres flaskehætten, og nålen til en steril injektor indsættes. Væske ekstraheres fra kolben og sås på blodagar og chokoladeagar.

Hvis der er vækst, udføres en Gram, subkulturer i specifikke medier, biokemiske test og antibiogram.

I automatiserede metoder udsender Bact / Alert-udstyret en alarm, når det registrerer, at et hætteglas er positivt. På samme måde skal det tappes på blodagar og chokoladeagar.

En anden metode, der vinder terræn, er at analysere kolben efter 6 timers inkubation gennem massespektrometri. Denne metode har bidraget til at øge følsomheden og hastigheden af ​​diagnosen.

Resultater

Så længe blodkulturflasken er negativ, kan foreløbige mellemrapporter gives til den behandlende læge. Rapporten viser, at den er negativ i de timer, den har inkuberet. Hvis det f.eks. Går negativt indtil den fjerde dag, rapporteres det som følger:

Foreløbigt resultat: negativ kultur ved 96 timers inkubation.

Bemærk: undersøgelsen fortsætter i 240 timer.

Hvis blodkulturen er positiv, informeres den behandlende læge straks, og der sendes en rapport med mindst koloniets gram. Eksempel:

Foreløbigt resultat: I positiv kultur efter 48 timers inkubation observeres gram-negative baciller og negativ oxidase. Identifikation og følsomhedstest er i gang.

Denne information hjælper den behandlende læge med at starte en empirisk terapi mod den mulige mikroorganisme, mens den venter på laboratoriets endelige resultat.

Efter afslutningen af ​​den bakteriologiske undersøgelse, det vil sige mikroorganismen er identificeret, og antiogrammet er tilgængeligt, skal den endelige rapport sendes så hurtigt som muligt.

Der skal udvises særlig omhu, hvis målorganismen er Neisseria gonorrhoeae eller Neisseria meningitidis, da disse bakterier hæmmes i nærværelse af høje koncentrationer af natriumpolyanethosulfonat (SPS).

Derfor bør denne forbindelse ikke overstige 0,025% i blodkulturflasker.

På den anden side, hvis blodkulturprøven først udtages i Vacutainer-rør, har disse rør koncentrationer af SPS, der er giftige for meningokokker og gonokokker, så blodet skal overføres inden for en time til buljongkultursystemet.

Hvordan man kan se, om en blodkultur er positiv eller forurening

En blodkultur betragtes som forurenet, når der kun er vækst i et enkelt blodkulturhætteglas fra det samlede antal. Og mistanken om kontaminering øges, hvis den isolerede mikroorganisme er en normal hudmikrobiota: eksempel: koagulase-negativ Staphylococcus, Propionibacterium spp, blandt andre.

Hos immunkompromitterede patienter bør imidlertid ingen mikroorganisme overses, men i dette tilfælde skal mikroorganismen vises i flere prøver.

På den anden side, hvis følsomheden over for antibiotika for den samme mikroorganisme isoleret i to forskellige prøver er den samme, er infektionen reel.

Et andet kendetegn er bakterielasten, da forurenede blodkulturer vokser sent, mens reelle infektioner hos ubehandlede patienter generelt er positive ved 14 timers inkubation, når mikroorganismen er ikke-generende.

På den anden side kan det involvere mikroorganisme hos patienter, der behandles med antimikrobielle stoffer, tage tid at vokse, fordi belastningen er meget lav.

Forekomsten af ​​mere end en mikroorganisme kan antyde forurening, men hvis det samme resultat gentages i flere skud fra forskellige steder, er det ægte.

Referencer

1. "Blodkultur." Wikipedia, The Free Encyclopedia. 3 jul. 2019, 17:28 UTC. 14. juli 2019, 19:05 da.wikipedia.org
2. Hervé B. Nuevas tecnologías en diagnóstico microbiológico: automatización y algunas aplicaciones en identificación microbiana y estudio de susceptibilidad. Rev. Med. Clin. Condes. 2015; 26(6) 753-763. Disponible en: reader.elsevier.com
3. Villarroel P. Capítulo 20: Sepsis y riesgo de enfermedad cardiovascular. Salud cardiovascular. pp 187-194. Disponible en: fbbva.es
4. Sánchez R, Rincón B, Cortés C, Fernández E, Peña S, Heras E.M. Hemocultivos: ¿Qué te han contado y qué haces? Enferm. glob. 2012; 11 (26): 146-163. Disponible en: scielo.isc
5. Pardinas-Llergo M, Alarcón-Sotelo A, Ramírez-Angulo C, Rodríguez-Weber F, Díaz-Greene E. Probabilidad de éxito de obtener un hemocultivo positivo. Med. interna Méx. 2017; 33 (1): 28-40. Disponible en: scielo.org