KRYDSFORSØG: HVAD ER DE TIL, TEKNIK, RATIONALE, FASER - MEDICIN

Den crossmatch er der gennemført en række laboratorieforsøg at bestemme, om blodprodukter fra en donor (hovedsagelig fuldblod og pakket globulære) er forenelige med modtagerens blod.

Det er en yderligere komplementær test til ABO-kompatibilitet og Rh-faktor. Årsagen til crossmatching er, at nogle gange to personer (donormodtager) kan have den samme ABO- og Rh-gruppe, men deres blod er stadig uforeneligt.

Kilde: unsplash.com

En sådan inkompatibilitet skyldes tilstedeværelsen af antistoffer mod en række proteiner af røde blodlegemer kendt som mindre antigener. Disse antigener testes ikke rutinemæssigt, da de er for blodgruppe (ABO) og Rh-faktor.

Dette skyldes, at de mindre antigener er meget mindre hyppige og har et variabelt udtryk i hvert individ, derfor er det praktisk taget umuligt at gruppere dem i kategorier, som det gøres med gruppen og Rh-faktoren.

I stedet blandes donorrøde celler med patientserum (major match test) og patientrøde celler med donorserum (mindre matchningstest) for at detektere tilstedeværelsen af antigen-antistofreaktioner.

Når der er antistoffer mod mindre antigener, enten i patientens eller donorserum, siges testen at være positiv, så i de fleste tilfælde kan den bestemte blodenhed ikke overføres.

ABO Group

For fuldt ud at forstå, hvad krydsreaktioner handler om, skal du først kende det grundlæggende i blodgrupper.

I denne forstand er det vigtigste at vide, at blod kan klassificeres i fire grupper: A, B, AB og O.

Hver af disse grupper udtrykker på overfladen af de røde blodlegemer et bestemt protein (antigen), der identificeres som et fremmed element af antistofferne fra en potentiel receptor fra en anden gruppe.

Det mest slående ved antigen-antistofreaktioner i blodtilpasning er, at der ikke kræves nogen forudgående eksponering for antigenet for at antistoffer kan eksistere. Dette er kendt som naturlige antistoffer.

Naturlige antistoffer

Generelt er det nødvendigt, at antistoffer findes i en persons krop, at individets hvide blodlegemer tidligere er blevet udsat for antigenet.

Dette betyder, at der i den første kontakt mellem det fremmede antigen og organismen ikke er nogen antistoffer, da disse genereres senere, efter den indledende kontakt. Derfor er det umuligt for immunsystemet at have antistoffer mod for eksempel en bestemt virus, hvis det ikke tidligere har været udsat for det.

Den eneste undtagelse fra ovenstående er anti-AB antigener. I disse tilfælde har personen antistoffer mod antigenet, som deres røde blodlegemer ikke har, selvom de aldrig har været i kontakt med en anden persons røde blodlegemer. Dette er kendt som naturlige antistoffer.

Antigener og antistoffer relateret til blodgruppe

Blodgrupper bestemmes i tilfælde af ABO-systemet ved tilstedeværelsen af specifikke antigener (A eller B) på den røde blodlegemembran og i modsætning hertil antistoffer mod det fraværende antigen på erythrocyttmembranen.

Således udtrykker en person med blodgruppe A antigen A på overfladen af sine røde blodlegemer, mens der er anti-B-antistoffer i serumet.

Tværtimod findes B-antigenet i gruppe B-patienter, mens antistofferne er anti-A.

Nu har patienter med AB-blod både A- og B.-antigener, hvorfor der ikke er nogen antistoffer, da det ville ødelægge denne persons røde blodlegemer.

Det modsatte forekommer i gruppe O, hvor erythrocyttemembranen ikke præsenterer nogen af de to antigener (hverken A eller B), mens der i serumet findes anti-A og anti-B antistoffer.

ABO-gruppens uforenelighed

Fra det ovenstående kan kompatibiliteten af ABO-blodgrupper let udledes, da det at kende antigenet i erythrocytmembranen automatisk kender antistofferne i serumet. Så det:

- Blod A er kompatibelt med gruppe A og gruppe O.

- Blodgruppe B er kompatibel med blod B og O.

- Mennesker med gruppe O kan kun modtage O-blod (da de har anti-A- og anti-B-antistoffer), selvom deres blod modtages af alle andre grupper uden problemer, da det mangler antigener.

- Endelig. dem, der har blodgruppe AB, kan modtage blod fra alle andre grupper (A, B, O og selvfølgelig AB), da de ikke har antistoffer mod nogen af antigenerne. Imidlertid kan kun mennesker i gruppe AB modtage AB-blod, da alle andre grupper har antistoffer, der ville ødelægge disse røde blodlegemer.

Mindre antigener

Som med ABO-grupper kan der findes en række proteiner på overfladen af erythrocytter, der fungerer som antigener på samme måde som ABO-gruppeantigener.

Imidlertid er disse antigener ikke til stede i alle individer. Deres kombination er heterogen, og penetransen (niveauet af proteinekspression) er variabel, derfor er en klassificering i grupper som den der findes for ABO og Rh umulig. Det er her, det henter sit navn fra "mindre antigener", også kendt som "antigener med lav forekomst".

Selvom de ikke er hyppige, kan der være naturlige antistoffer mod mindre antigener. Blandt dem er de mest almindelige Lewis, MNS'er, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb og Kidd. Alle af dem er ansvarlige for meget alvorlige hæmolytiske og post-transfusionsreaktioner.

Derudover kan der være tilfælde af sensibilisering mod mindre antigener ved tidligere kontakt, enten med de antigene proteiner på grund af tidligere transfusioner eller på grund af krydsimmunitet.

Kryds immunitet

Det siges, at der er krydsimmunitet, når to antigener fra to forskellige kilder (for eksempel en rød blodlegeme og en bakterie) er meget ens, til det punkt, at antistofferne mod det ene af disse antigene proteiner også reagerer med det andet, fordi de er næsten identiske.

For at forstå dette bedre skal du tage det forrige hypotetiske eksempel (antigener fra en rød blodlegeme og en bakterie). I ingen af tilfældene er der naturlige antistoffer, men hvis en person udsættes for bakterierne, genererer de antistoffer mod den.

Sådanne antistoffer reagerer senere mod en rød blodlegeme, hvis dens antigener ligner meget bakterierne, der inducerede antistofferne.

Hvis dette sker, kan de røde blodlegemer med det bestemte antigene protein ikke gives til den person, der har antistofferne, da der ville være afvisning. Heri ligger vigtigheden af krydsreaktioner.

Hvad er crossmatching til?

Da det er umuligt at gruppere blod fra forskellige individer baseret på de mindre antigener, er den eneste måde at vide, om der er antistoffer mod de mindre antigener fra en anden persons røde blodlegemer i en persons blod, gennem krydsning..

I de tilfælde, hvor antistoffer er til stede, udløses en hæmolyse- eller agglutineringsreaktion, hvorfor det konkluderes, at reaktionen var positiv; der er antistoffer mod mindre antigener (selvom det ikke vides nøjagtigt hvilket). Ellers er testen negativ.

Basis

Krydsmatchninger er baseret på antigen-antistofreaktionen. Derfor er det med dem muligt at detektere, om der i en modtagers serum findes antistoffer mod antigenerne fra donorens røde blodlegemer (eller omvendt), hvilket inducerer en antigen-antistofreaktion.

Hvis der ikke er antistoffer, forekommer der ingen reaktion, og testen rapporteres negativ. Tværtimod, hvis reaktionen er positiv (der er hæmolyse eller agglutination under testen), kan det konkluderes, at antistofferne er til stede.

I denne forbindelse er det vigtigt at bemærke, at der kan være antistoffer mod røde blodlegemer i både donoren og modtagerens serum. Derfor er der to typer krydsreaktioner.

Typer krydsreaktioner

Antistoffer mod donorarytrocytter kan forekomme i patientens serum; men det modsatte kan også forekomme, det vil sige antistoffer i donors serum mod patientens røde blodlegemer.

Derfor er der to typer crossmatch:

- Stort krydsmatch.

- Mindre krydsmatch.

Begge typer udføres rutinemæssigt i blodbanken før transfusion af blodprodukter, da hvis nogen af testene er positive, er der en stor risiko for transfusionsreaktioner, der kan bringe patientens liv i fare.

Stort krydsmatch

Denne test vurderer, om modtagerens serum indeholder antistoffer mod donorens røde blodlegemer.

Hvis dette sker, kan blodprodukter ikke administreres, da en stor mængde antistoffer, der findes i patientens plasma, ødelægger donorens røde blodlegemer meget hurtigt og skaber katastrofale reaktioner i modtagerens krop i processen. Disse reaktioner er så alvorlige, at de kan være livstruende.

Mindre kryds

I dette tilfælde bestemmes det, om der er antistoffer mod modtagerens røde blodlegemer i donorens serum.

I så fald vil antistofferne begynde at ødelægge modtagerens erytrocytter. I betragtning af, at mængden af antistoffer er begrænset, er reaktionen imidlertid mindre intens; selvom det stadig er farligt.

faser

Både hoved- og mindre krydsmatch er opdelt i tre faser:

- Saltvand.

- Termisk eller inkubation.

- Coombs.

I den første fase blandes de røde blodlegemer og serum i saltopløsning. Efterfølgende tilsættes albumin, og prøven inkuberes ved 37 ° C i 30 minutter for endelig at fortsætte med coombs-fasen.

Teknik

Krydsmatchteknikken er relativt ligetil, da den involverer at tilføje donorrøde blodlegemer til patientens serum (større krydsmatch) såvel som modtagererytrocytter til donorserum (mindre krydsmatch).

For at inducere antigen-antistofreaktionen på relativt kort tid skal en række standardiserede trin følges. Disse trin opsummeres på en forenklet måde nedenfor.

Det er vigtigt at bemærke, at det næste afsnit beskriver den største kompatibilitetstest, selvom trinnene er de samme for den mindre kompatibilitetstest, men udveksling af oprindelsen af røde blodlegemer og serum.

Saltvand

- Sæt 2 dråber serum fra modtageren i testrøret (fra donoren, hvis det er mindre krydsmatch).

- Tag en prøve af røde blodlegemer fra donoren (fra modtageren, hvis det er mindre krydsmatch).

- Vask og centrifuger de røde blodlegemer.

- Resuspender i en opløsning mellem 3% og 5%.

- Læg en dråbe af denne opløsning i røret, der indeholder modtagerens serum.

- Bland forsigtigt.

- Centrifuge.

- Læs resultatet i displaylampe.

Termisk fase

- Tilsæt 2 dråber med 22% albumin til det rør, hvor saltfasen var afsluttet.

- Inkuber ved 37 ° C i 30 minutter.

- Centrifuge i 15 sekunder.

- Læs resultatet i displaylampe.

Coombs-fase

- Tag cellerne fra røret og vask dem med saltopløsning.

- Fjern supernatanten.

- Tilsæt to dråber Coombs-reagens.