LACTOPHENOL BLÅ: EGENSKABER, SAMMENSÆTNING, KLARGØRING, ANVENDELSER - KEMI - 2025

Den lactophenol blå eller blå bomuld fremstilles med enkelt farvestof egenskaber. Det bruges i kliniske laboratorier til hovedsageligt at farve svampestrukturer såsom hyfer, kimrør og sporer.

Det hjælper med den formodede eller foreløbige diagnose af visse svampe. Det anbefales imidlertid altid at forstærke diagnosen med mere specifikke test, såsom biokemiske eller serologiske tests.

Grafisk gengivelse af lactophenolblå plet, udstrygning farvet med lactophenolblå, mikroskopmonteret præparat. Kilde: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Lactophenolblå består af mælkesyre, anilinblåt, glycerin, phenol og deioniseret vand. Det kan tilberedes på laboratoriet, eller det kan købes klar til brug. Når den er forberedt, er den klar til brug, under ingen omstændigheder bør den fortyndes, da denne handling giver frygtelige resultater.

Koncentrationen af ​​dets komponenter gør den ideel til farvning af svampestrukturer, da fenol eliminerer den ledsagende bakteriemikrobiota, mens mælkesyre genererer en beskyttende film omkring svampestrukturen. Endelig har anilinblå en affinitet til at klæbe til svampens strukturer.

Basis

Med lactophenolblå udføres en enkel farvning af svampestrukturerne i en bestemt mykologisk kultur. Det kaldes enkelt, fordi det kun bruger et farvestof.

Laktophenolblå, bortset fra farvning, fungerer også som en klarere af prøven takket være den fælles virkning af mælkesyre og phenol, derudover opfører phenol sig som en mordant og forhindrer samtidig lysering af mikroorganismen ved at hæmme de hydrolytiske enzymer, der kan være til stede.

Mens mælkesyre bevarer morfologien i svampens strukturer.

På den anden side har anilinblå egenskaben vedhæftning eller binding til strukturer, der indeholder chitin. Strukturerne er farvet lyseblå.

Det skal bemærkes, at cellevæggen i svampe-mikroorganismer, især forme, indeholder chitin, hvorfor dette farvestof er ideelt til farvning af disse mikroorganismer.

egenskaber

Lactophenolblå opløsning er et stærkt surt, let overskyet, vandigt farvestof med en lyseblå farve. Det forbliver stabilt, hvis det opbevares mellem 15 ° C og 25 ° C. Flasken skal holdes korrekt lukket. Det er irriterende og ætsende for hud og slimhinder.

Sammensætning

Formlen til fremstilling af en liter lactophenolblå er som følger:

-250 g / L mælkesyre

-1,0 g / L anilinblå eller methylblå

-500 g / l glycerol

-250 g / l phenol

-250 ml deioniseret eller destilleret vand.

Phenolen opløses i det tidligere opvarmede vand. Mælkesyre og glycerin tilsættes og blandes meget godt. Til sidst opløses anilinblå. Det blandes igen og er klar til brug.

Portionerne til fremstilling af 80 ml lactophenolblå opløsning er:

-20 g phenolkrystaller

-20 ml mælkesyre

-40 ml glycerin eller glycerol

-20 ml destilleret vand.

Brug

Det bruges til at plette svampestrukturer og gennem de morfologiske egenskaber observeret på mikroskopisk niveau for at være i stand til at stille en formodende diagnose af svampen.

Behandle

Farvning af svampestrukturer i kulturer

- Tag en ren kultur af svampen, hvis strukturer skal overholdes.

- Arbejde helst i en laminar flowhætte eller under lighteren med en maske og handsker, da det er nødvendigt at overholde biosikkerhedsstandarder, fordi de fleste forme er lette at sprede i miljøet og derfor udgør en fare for operatøren.

- En dråbe lactophenolblå placeres på et lysbillede.

- Klip en lille firkant af klæbebånd af god kvalitet, og klæb den meget forsigtigt til enden af ​​det kolde steriliserede platinhåndtag.

- Platinhåndtaget bringes tæt på den mest overfladiske del af svampekolonien, og kulturen røres meget omhyggeligt, nøjagtigt hvor klæbebåndet er placeret.

- Derefter føres det til objektglasset og placeres lige på dråben lactophenolblå, idet man passe på, at båndet udvides perfekt og smøres med farvestoffet. Platinhåndtaget er meget forsigtigt fjernet.

- En anden dråbe lactophenolblå placeres på båndet og et dækglas på toppen. Brug ikke for meget pres for ikke at ødelægge svampens strukturer, da de er ekstremt skrøbelige. Farvestoffet skal have lov til at virke i ca. 3 til 4 minutter.

- Efter dette tidspunkt er præparatet klar til at blive observeret under et mikroskop i forstørrelse 10X eller 40X. Hvis der kræves 100X-observation, skal nedsænkningsolie anvendes.

- Svampens strukturer er generelt farvet blå med undtagelse af de nedbrydende svampe, der vil bevare deres karakteristiske brune farve på denne type svampe.

Direkte biologisk prøvefarvning

Hvis det er påkrævet at undersøge en direkte biologisk prøve, såsom sputum, pus, ekssudater, sekretioner, skal disse have en forudgående procedure for dekontaminering af prøven. Der anvendes NaOH-opløsning.

I tilfælde af hårprøver kan disse farves direkte.

Flere hårstråede (10 i alt) tages fra de formodede tinea capitis-læsioner (alopeciske områder) og placeres på et objektglas (3 til 4 hår pr. Objektglas) Et par dråber lactophenolblå placeres på toppen og dækkes straks med et dækglas.

Tag fat i glideren med pincet, og opvarm forsigtigt over en brænder. For at gøre dette skal du foretage 3 til 4 hurtige passager gennem flammen. Se mikroskopet ved 40X og kig efter sporer uden for eller inde i håret (henholdsvis ectothrix eller endothrix). Tilsæt om nødvendigt nedsænkningsolie og overhold ved 100X.

Kimrørfarvning ved identifikation af

Efter inkubering af den formodende kultur af Candida albicans i humant serum i 2 til 4 timer ved 37 ° C, tages en del af opløsningen og farves med lactophenolblå. Præparatet observeres under mikroskopet ved 40X. Kimrøret er til stede, og blastosporerne farver lyseblå.

Lactophenol sikkerhedsdatablad

National Fire Protection Association (NFPA) opretter sikkerhedsdatabladet for kemiske stoffer med hensyn til risikoen for, at det repræsenterer i henhold til forskellige aspekter. Disse symboliseres ved en farvet romb og et tal fra 0- Fire.

Sundhedsfarer identificeres med blåt, antændelighed i rødt, ustabilitet eller reaktivitet i gult og enhver særlig fare i hvidt.

Sundhed

Den sundhedsmæssige risiko, som lactophenolblå udgør i henhold til NFPA, er niveau 3. Dette betyder, at stoffet er ekstremt farligt, når det indtages eller i direkte kontakt med hud eller slimhinde.

Det er et stærkt ætsende og irriterende stof.

Ved kontakt med hud og slimhinder forårsager det alvorlige forbrændinger.

Hvis det indtages, kan det forårsage hovedpine, forvirring, sløvhed, bevidstløshed, åndedrætsstop og endda død.

Antændelighed

I henhold til NFPA er Lactophenol Blue bedømt til niveau 1 for antændelighed. Dette betyder, at det kun brænder, hvis det opvarmes over 94 ° C.

ustabilitet

Listet i henhold til NFPA på niveau 0 (nul) med hensyn til reaktivitet. Dette betyder, at det ikke har nogen risiko for reaktivitet, dvs. at det er et kemisk stabilt stof.

Særlige farer

Det giver ingen ekstra særlige farer.

Referencer

1. SAR Laboratorium. Lactophenol Blue. 2010. Tilgængelig på: labsar.com.
2. Anvendt klinisk kemi laboratorium. Lactophenol blå. 2015. Tilgængelig på: cromakit.es
3. Merck Laboratories. Lactophenol blå mikroskopi i opløsning. 2017. Tilgængelig på: Brugere / Equipo / Downloads
4. Nødkort. Lactophenolblå opløsning til svampefarvning. Universidad Pontificia Javeriana, Bogotá Colombia. 2014. Tilgængelig på: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Teknik til farvning af svampestrukturer med vegetabilske farvestoffer som et ikke-forurenende alternativ. Bioagro, 2011; 23 (1): 65-68. Fås på: Redalyc.
6. Laboratorie Himedia. Lactophenol Cotton Blue. 2017. Tilgængelig fra: himedialabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, skuespiller J, Dasgupta A. Biokemiske test og farvningsteknikker til mikrobiel identifikation. Science Direct, 2017; 61-73. Fås fra: Elsevier